酶ELISA試劑盒(he)步驟:
一、靜置貼壁(bi)細胞(bao)(包括半貼壁(bi)細胞(bao)的培(pei)養(yang))培(pei)養(yang)要求
1、細胞(bao)要通過充分漂洗,以(yi)盡量除去消化液的毒性(xing);
2、細胞(bao)接種時濃度要稍(shao)大一些,至少為5×108細胞(bao)/L;
3、培(pei)養(yang)基可用Eagle(MEM)或DNEM培(pei)養(yang);
4、小牛血(xue)清(qing)濃度為10%-80%;
5、應在(zai)37℃5% CO2的培(pei)養箱中培(pei)養;
6、在(zai)起始的2天(tian)中盡量減少振蕩,以防止(zhi)剛貼壁的細(xi)胞發(fa)生脫落(luo),漂浮;
7、待細胞基(ji)本貼壁伸展(zhan)并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或(huo)外周血中的懸(xuan)浮細(xi)胞經(jing)靜(jing)置(zhi)培養(yang)1周時,應將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液經(jing)低速離心(xin)后換液。