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豬elisa試(shi)劑盒操作與事項原理
  • 發布日期:2020-10-07      瀏覽次數:1059
    • 豬elisa試劑盒的原理:

      豬elisa試劑盒的(de)(de)(de)(de)(de)基礎是抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)固(gu)相化(hua)(hua)及抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)酶標(biao)記。在測定(ding)(ding)時(shi),受(shou)檢標(biao)本(測定(ding)(ding)其(qi)(qi)中的(de)(de)(de)(de)(de)抗(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)或抗(kang)原(yuan))與固(gu)相載(zai)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)表面(mian)的(de)(de)(de)(de)(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)起反應(ying)。此時(shi)固(gu)相上(shang)的(de)(de)(de)(de)(de)酶量(liang)與標(biao)本中受(shou)檢物(wu)(wu)(wu)(wu)質的(de)(de)(de)(de)(de)量(liang)呈一定(ding)(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)比(bi)例。再加入(ru)酶標(biao)記的(de)(de)(de)(de)(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti),也通過反應(ying)而結合在固(gu)相載(zai)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)上(shang)。結合在固(gu)相載(zai)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)表面(mian)的(de)(de)(de)(de)(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)仍保持其(qi)(qi)免(mian)疫學(xue)活性,酶標(biao)記的(de)(de)(de)(de)(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)既留存其(qi)(qi)免(mian)疫學(xue)活性,又(you)留存酶的(de)(de)(de)(de)(de)活性。加入(ru)酶反應(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)后,底(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)被酶催化(hua)(hua)成為有色(se)產物(wu)(wu)(wu)(wu),產物(wu)(wu)(wu)(wu)的(de)(de)(de)(de)(de)量(liang)與標(biao)本中受(shou)檢物(wu)(wu)(wu)(wu)質的(de)(de)(de)(de)(de)量(liang)直接相關,故可根據呈色(se)的(de)(de)(de)(de)(de)深淺進(jin)行定(ding)(ding)性或定(ding)(ding)量(liang)分析。因為酶的(de)(de)(de)(de)(de)催化(hua)(hua)效率很(hen)高(gao),間(jian)接地放(fang)大了免(mian)疫反應(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)結果,使測定(ding)(ding)方法達(da)到很(hen)高(gao)的(de)(de)(de)(de)(de)敏感度。

      豬elisa試劑盒操作步驟:

      1.使用前(qian)將試劑(ji)盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。

      2.取所需用(yong)量(liang)酶標板條,設空白對照1孔(kong)(kong)、陰性(xing)/陽(yang)性(xing)對照各2孔(kong)(kong),未用(yong)的板條盡快密封,2~8℃保(bao)存。

      3.空白對(dui)照(zhao)孔(kong)(kong)加樣品稀釋液100μl;陰(yin)、陽(yang)(yang)性對(dui)照(zhao)孔(kong)(kong)分別(bie)加入陰(yin)、陽(yang)(yang)性對(dui)照(zhao)100μl;樣品孔(kong)(kong)每孔(kong)(kong)加入稀釋后的(de)樣品100μl。

      4.混(hun)勻,置37℃反應30分鐘。

      5.扣去(qu)孔(kong)內液體,每孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液,靜置(zhi)30秒后棄去(qu),重復(fu)洗滌(di)5次,拍干。

      6.每孔加(jia)酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。

      7.洗滌(di),同步驟5。

      8.每孔依次加(jia)底物液A、底物液B各50μl,混(hun)勻,37℃避光反(fan)應10分(fen)鐘。

      9.每孔加(jia)終止液50μl,混(hun)勻,用空白孔調(diao)零(ling),于450nm(可用630nm作參(can)比波長)測定各(ge)孔吸光值(A值)。

      豬elisa試(shi)劑盒注意事項:

      1.實(shi)(shi)驗(yan)操作時(shi)需(xu)戴手套、穿(chuan)工(gong)作衣,嚴格健全(quan)和(he)執行(xing)消毒隔離制(zhi)度,各種(zhong)實(shi)(shi)驗(yan)廢棄(qi)物都應按(an)傳染(ran)物處理(li)。

      2.終止(zhi)液具有腐(fu)蝕性,應避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請(qing)立即用大量自來水沖洗。

      3.酶標(biao)(biao)板從(cong)冷(leng)藏環(huan)境(jing)中(zhong)取出時應恢復至室溫方可開袋,未用(yong)完的(de)(de)酶標(biao)(biao)板需放入有(you)干燥劑的(de)(de)密(mi)封袋中(zhong)保存(cun)。

      4.濃縮洗滌液在低溫時容易(yi)結晶,使用時需(xu)恢(hui)復至室溫以*溶解(jie)。

      5.洗(xi)滌時各孔均需加滿(man)液體,防止孔口有游離酶不能(neng)洗(xi)凈。

      6.用于檢(jian)測(ce)的樣品應保持新鮮。

      7.試驗(yan)結果的判定必須以(yi)酶標(biao)儀(yi)讀數為準。

      8.不同批號(hao)試劑(ji)組分(fen)不得(de)混用。

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