特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣(yang)品。
2. 根據地(di)黃保守序列設計的專一(yi)性引物，與相關病毒無(wu)交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百(bai)拷貝/反應。
4. 一管(guan)式熒光定(ding)量 PCR 檢測，避免后續(xu)污(wu)染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只(zhi)適用于科研，不能用于臨床診(zhen)斷。

使用方法：
一、樣品(pin)采集：
1、食(shi)品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的采集與(yu)預(yu)培養(yang)按照樣(yang)品(pin)的采集與(yu)預(yu)培養(yang)按照《食(shi)品(pin)衛生微(wei)生物學檢(jian)驗阪崎腸(chang)桿菌檢(jian)驗要求進行(xing)。
2、血液樣品：用無菌注射器抽(chou)取受檢者靜脈血2mL，注入(ru)無菌EDTA2Na(或檸(ning)檬酸鈉)抗凝管(guan)，立即混勻。
3、糞(fen)便樣品：取糞(fen)便置于滅(mie)菌的(de)收集管中送(song)檢(jian)。
4、病灶(zao)部位(wei)樣品：取發(fa)病部位(wei)新鮮滲出物、粘液膿(nong)血送檢(jian)。
一、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei)例）
1. 注意：由于標(biao)準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一(yi)定要在獨立的區域進(jin)行，千萬不能污染(ran)樣品或本試(shi)劑盒的其他成分）。為增加(jia)產(chan)品穩定性和避免擴散傳(chuan)染(ran)性病(bing)原，本產(chan)品不提供活(huo)體樣品做陽性對照，只(zhi)提供可以直(zhi)接使用的 DNA段作為陽性對照(zhao)。
2. 標(biao)記(ji) 6 個離心管，分(fen)別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭(tou)分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀(xi)釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(dui)照，充分(fen)震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽性對照。放冰上(shang)待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(dui)照(上(shang)步稀釋(shi)所得)，充分震蕩 1 分鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放(fang)冰上待用。
6. 換槍(qiang)頭，在(zai) 5 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yang)性對照。放冰上待用。
7. 重復上面(mian)的操作直(zhi)到(dao)得到(dao) 6 個稀釋度(du)的陽性對(dui)照。放冰上待用。
注：上述樣品(pin)建議(yi)經過(guo)增菌后(hou)，收集培養(yang)物用于檢(jian)測。 
二、DNA提取：
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液，按(an)以下說(shuo)明進行DNA核(he)酸(suan)的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限(xian)公(gong)司(si)生產的DNA提取試劑盒(過柱法(fa)-熒光配套)或(huo)其他合適的商業化產品，并按(an)照相(xiang)應試(shi)劑盒說明進(jin)行操作(zuo)。
1、液體培養(yang)物：取液體培養(yang)物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無菌離心管中，8000rpm離心3min，盡量吸(xi)棄上清，加入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行PCR反應。
2、固體培養物：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清(qing)5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品：挑取米粒大(da)小糞便于滅菌離心管中(zhong)，加入0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振蕩混勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘，棄上清(qing)，沉淀中加入50μL DNA抽提液(ye)充分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jin)行PCR反應。
4、其他液(ye)體標本(ben)：取標本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上(shang)清(qing)，沉淀中加入50μL DNA抽提液(ye)充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清5μL進(jin)行PCR反應。
注(zhu)：陽性對照和陰性對照為已經抽提好的核(he)酸(無需提(ti)取)，直接取5μL加入到反(fan)應體系中即可。由于陽性對照(zhao)(zhao)濃度(du)較高，建議在樣品制備區域加入陽性對照(zhao)(zhao)。 
實(shi)驗(yan)流程(cheng)：
1. 整個檢(jian)測過程應嚴格按照本(ben)(ben)說明(ming)書(shu)要求分(fen)別在試劑(ji)準備區(qu)、樣本(ben)(ben)處理(li)區(qu)和PCR擴增區進(jin)行(xing)操作，各區實(shi)驗服、儀器 、耗材應獨立(li)使用，不能混用；實驗用吸頭(tou)采(cai)用帶濾(lv)芯吸頭(tou)；樣(yang)本處理區(qu)(qu)應配有生物安全(quan)柜(ju)，樣(yang)本處理在生物安全(quan)柜(ju)中進行操作(zuo)；三個區(qu)(qu)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操(cao)作(zuo)，且完成實驗后立即上機檢(jian)測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無(wu)核酶處理。
3. 每次(ci)實驗應(ying)該設置陰、陽性對(dui)照。
4. 試(shi)劑盒所有試(shi)劑在使用前應該在常溫下充分融化混(hun)勻，并應瞬時離心。
5. 試(shi)劑盒內(nei)所(suo)配陰性和(he)陽性對照在一(yi)次使(shi)用前(qian)應全部轉移至標本準備區，并單獨存放(fang)。
6. 為防(fang)止熒光干擾，應避(bi)免裸手直接接觸(chu)PCR反應管，并應避(bi)免在PCR反應(ying)管上進(jin)行任何標記。
7. 儀器(qi) 擴增(zeng)相關(guan)參(can)數應按照本說明(ming)書(shu)相關(guan)要求進行設置(zhi)；不(bu)同批(pi)號試(shi)劑(ji)不(bu)能混用。
8. ABI系列(lie)熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正(zheng)，淬(cui)滅基(ji)因選擇None。
9. 實驗過程中產品(pin)的廢棄物應(ying)該進行無害化(hua)處理(li)后方可丟棄。
儲存條(tiao)件(jian)：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含(han)熱(re)原和內毒素的試(shi)管(guan)，操作過(guo)程中避免任何細胞刺(ci)激(ji)，收集血液后，3000 轉(zhuan)離心10 分鐘將血(xue)清和紅細胞迅速(su)小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuan)離(li)心30 分鐘(zhong)取上清。
3. 細(xi)胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚(ju)合物。
4. 組織(zhi)勻漿：將(jiang)組織(zhi)加(jia)入適量生理鹽水(shui)搗碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)取上(shang)清。
5. 保存(cun)：如果樣本收集后不及時檢(jian)測，請按(an)一次用(yong)量分裝，凍(dong)存(cun)于-20℃，避免反復凍(dong)(dong)融(rong)，在室溫下(xia)解凍(dong)(dong)并確保樣品均勻地充(chong)分解凍(dong)(dong)。
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao)) 脫(tuo)氯阿(a)托伐醌Deschloro Atovaquone質量規(gui)格：美國進(jin)口

人上皮細胞;MCF-10A-d3Azasetron-d3, 質量(liang)規格(ge)：美國進口(kou)

FD6細胞(bao)(bao)，人(ren)細胞(bao)(bao)與倉鼠肺細胞(bao)(bao)雜(za)交細胞(bao)(bao) 小鼠(shu)畸(ji)胎瘤細胞,P19細(xi)胞 CM-H103胎(tai)兒成纖維細胞*培養基100mLY-25130 鹽(yan)酸(suan)Y-25130 質量規(gui)格：美國進(jin)口(kou)

P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2去甲(jia)基Desmethyl Nizatidine質(zhi)量規格(ge)：美(mei)國進(jin)口(kou)

Promocell C-27437 Preadipocyte DiffereiationMedium KIT, 前脂肪細胞分(fen)化培養基套(tao)裝(zhuang) 500mlC1aGentamicin C1a質量規(gui)格：美國進口(kou)
CD274 Others Rat 大(da)鼠(shu) PD-L1 / B7-H1 / CD274 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對照) 羧酸(suan)Dasatinib Carboxylic Acid質量規格(ge)：美國進(jin)口

小鼠(shu)樹突(tu)狀細(xi)胞(bao)肉(rou)瘤(liu)低轉移細(xi)胞(bao)(綠色(se)熒光蛋白(bai)標記);DG6-GFPN-去(qu)甲基(ji)加蘭(lan)他敏(min)N-Desmethyl Galanthamine質量(liang)規格：美國進口(kou)

小鼠誘導(dao)性多潛能(neng)干細(xi)胞;PUMC-mips-B5 I型膠(jiao)原(yuan)酶(含(han)100mL酶(mei)解緩(huan)沖液(ye)) 10mLO-去甲基(ji)加蘭他敏O-Desmethyl Galanthamine質量規格(ge)：美國(guo)進口(kou)

Saos-2，人(ren)成骨(gu)肉瘤細(xi)胞 Huma-去甲基加(jia)蘭他敏β-D-葡萄糖苷(gan)酸(suan)O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide質(zhi)量規(gui)格：美國進(jin)口

EM2 Others Mouse 小鼠 EM2 人細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對照(zhao)) 異（雜質）iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity)質(zhi)量規格：美國進口(kou)
人表皮色素(su)細胞-深(shen)色素總RNAHEM-d NAL-二(er)甲酯鹽酸鹽質量規格(ge)：0.98L-Glutamic acid dimethyl ester

盤羊皮膚細(xi)胞;ASHS2 中國倉鼠(shu)二氫還原酶缺(que)陷細胞，CHO/dhFr-細胞 Ca763細胞，615小鼠癌(ai)瘤(liu)株L-甲(jia)酯(zhi)鹽酸鹽質量規格：0.98L-Leucine methyl ester

轉化細(xi)胞L-苯甲酯鹽酸鹽質量規格：>99%,BRL-Phenylalanine methyl ester

HA Others H5N1 甲型流感(gan) H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞裂解液 (陽性對照) KC-5103質量(liang)規格：>98.5%,BR,可用于細(xi)胞培養(yang)Tifluadom/KC-5103

CL-0322Beta-TC-6(小(xiao)鼠胰島素瘤胰島β細胞(bao))5×106cells/瓶×2/質(zhi)量(liang)規格：>99%,BRValacyclovir HCl
香(xiang)櫞PCR鑒定試(shi)劑盒直銷小鼠(shu)胰腺癌細胞(bao)(B類);Pan02 透明質酸酶(含(han)100mL酶解緩沖液(ye)) 10mL4-溴芘(>95.0%(GC))質量規格：>95.0%(GC)4-Bromopyrene

A549/DDP, 人(ren)肺腺癌耐(nai)藥細胞株(zhu) Human1,6-二(er)氨基芘(>98.0%(HPLC)(N))質量(liang)規(gui)格：>98.0%(HPLC)(N)1,6-Diamipyrene

PLA2G1B Others Human 人 PLA2G1B / PLA2 人細(xi)胞裂解液 (陽性(xing)對照) 1,3-二(er)氨基芘質量規格：1,3-Diamipyrene

人(ren)小