儲存條(tiao)件：
14℃或－20℃樣品收(shou)集、處理及保存方法
1. 血(xue)(xue)清(qing)：使用不(bu)含(han)熱原和內(nei)毒(du)素的(de)試管(guan)，操作(zuo)過程中避免任何細胞刺激，收(shou)集血(xue)(xue)液(ye)后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細(xi)胞迅速小心地分離(li)。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心(xin)30 分鐘取上清。
3. 細胞(bao)上清液：3000 轉離心(xin)10 分鐘去除顆粒(li)和(he)聚合物。
4. 組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)：將組(zu)織(zhi)加入適量生(sheng)理鹽水搗碎。3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取上清。
5. 保存(cun)：如果樣(yang)本收集后不及時檢測(ce)，請按一次用(yong)量分裝(zhuang)，凍存(cun)于-20℃，避免反復凍(dong)融，在室(shi)溫下解(jie)凍(dong)并確保樣(yang)品均勻(yun)地充分(fen)解(jie)凍(dong)。

特點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用，用戶只需要(yao)提供病(bing)毒樣品。
2. 根據(ju)地黃保守序列設計的專一性引(yin)物，與相關(guan)病毒無(wu)交叉(cha)反應。
3. 靈敏度可(ke)以達到幾百拷貝/反應(ying)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢(jian)測，避免后(hou)續污染(ran)。
5. 本試劑盒足(zu)夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只(zhi)適用(yong)于(yu)科(ke)研，不能用(yong)于(yu)臨床診(zhen)斷。

使用方法(fa)：
一、樣品采集：
1、食品(pin)(pin)樣(yang)品(pin)(pin)：樣(yang)品(pin)(pin)的采集與預培養(yang)按照樣(yang)品(pin)(pin)的采集與預培養(yang)按照《食品(pin)(pin)衛生(sheng)微生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗(yan)阪崎(qi)腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗(yan)要(yao)求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取(qu)受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬(meng)酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便(bian)樣品：取糞便(bian)置(zhi)于滅(mie)菌的收集管(guan)中送(song)檢。
4、病(bing)灶部(bu)位(wei)樣品：取發病(bing)部(bu)位(wei)新鮮滲出物、粘(zhan)液膿血送檢(jian)。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由(you)于標準品(pin)濃度非常高，因此下(xia)列(lie)稀(xi)釋操作一定要在獨立的區域進行，千(qian)萬(wan)不能污染(ran)樣(yang)品(pin)或(huo)本試劑盒的其他成分）。為增加(jia)產(chan)(chan)品(pin)穩(wen)定性和避免擴(kuo)散傳染(ran)性病原，本產(chan)(chan)品(pin)不提供活體(ti)樣(yang)品(pin)做陽性對照，只提供可(ke)以直接使用的 DNA段作為陽性(xing)對照。
2. 標記(ji) 6 個離心(xin)管，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍頭(tou)分別(bie)加入 45 μL 熒光 PCR 模板(ban)稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性(xing)對照。放冰(bing)上待用。
5. 換槍頭(tou)，在 6 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照(上步(bu)稀(xi)釋所(suo)得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用(yong)。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照到 5 號管中，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對照。放冰上待(dai)用。
7. 重復上面的操作直(zhi)到(dao)得到(dao) 6 個稀釋度(du)的(de)陽性對照。放冰上待用(yong)。
注：上述樣品建議經(jing)過(guo)增菌后，收集(ji)培(pei)養物(wu)用(yong)于檢測。 
二、DNA提取：
可采用PCR試劑盒(he)配備的DNA抽(chou)提(ti)液，按以下(xia)說明進行DNA核酸的(de)粗(cu)提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產的(de)DNA提取試劑(ji)盒(he)(過柱法-熒光配(pei)套)或其他(ta)合(he)適的商業化產品，并(bing)按照相應試(shi)劑盒說明(ming)進行操作。
1、液(ye)體培養(yang)物：取(qu)液(ye)體培養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離心管中，8000rpm離心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸棄上清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反應。
2、固體(ti)培養物：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清(qing)5μL進行PCR反應(ying)。
3、糞便(bian)樣品：挑取米粒大(da)小(xiao)糞便(bian)于滅菌離(li)心(xin)管(guan)中，加入0.5mL生(sheng)理鹽水，振蕩混(hun)勻，13000rpm離心3分鐘，棄上(shang)清，沉淀中加入(ru)50μL DNA抽提液充分混勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
4、其他液(ye)體(ti)標本：取標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
注：陽性對照(zhao)和(he)陰性對照(zhao)為已經(jing)抽提好的核酸(suan)(無(wu)需提取)，直接取5μL加入到反應體系中(zhong)即(ji)可。由于陽(yang)性對(dui)照濃度較高，建議在樣品制備區域加入陽(yang)性對(dui)照。 
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血(xue)凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (β-form)質量(liang)規格：>90.0%(T)

小鼠(shu)子(zi)細胞(bao);U14三(1,3-二苯基-1,3-丙(bing)二(er)酮基)(1,10-鄰二(er)氮雜菲)銪(Ⅲ)(>95.0%(T))Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)質(zhi)量規格：>95.0%(T)

METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 桿狀病毒-昆蟲(chong)細(xi)胞裂解液 (陽性對(dui)照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基(ji))(>98.0%(HPLC)(T))3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin質量規格(ge)：>98.0%(HPLC)(T)

CM-M001小鼠肺(fei)微血管內皮細(xi)胞*培(pei)養基100mL 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨(an)基)(>98.0%(T))3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin質(zhi)量(liang)規格：>98.0%(T)

Hela, 人細(xi)胞系 小鼠成纖維細胞,3T3TK細胞 SPA-A1(肺腺癌細胞)4,4'-雙(shuang)(5-甲(jia)基-2-苯并惡唑(zuo)基)芪(升華提)(>96.0%(HPLC))4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)質(zhi)量規格(ge)：>96.0%(HPLC)
JEG-3(人絨毛膜癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細胞(bao)裂解液 (陽性對照) 輪環藤寧四(si)乙酸/1,4,7,10-四氮(dan)雜環十二烷-1,4,7,10-四乙(yi)酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid質(zhi)量(liang)規(gui)格：>95%

人成骨肉瘤細胞;Saos-2p, p’-DDE(標準品(pin))p, p’-DDE質量規格：分析標準品

PPP3CA Others Human 人(ren) PPP3CA / 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲細胞裂解液 (陽性(xing)對照) p, p’-DDE標準(zhun)溶液(100μg/ml,u=3%)p, p’-DDE solution質量規(gui)格：100μg/ml,u=3%

CL-0429Romas(人瘤細胞)5×106cells/瓶(ping)×2敵草(cao)腈(標準品)Dichlobenil質量規格(ge)：分(fen)析(xi)標準(zhun)品

人絨毛膜內皮細胞 人胚(pei)胎皮膚成纖維細胞，CCC-ESF-1細胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細胞)乙二醇苯(ben)(標(biao)準品)Ethylene glycol monophenyl ether質量(liang)規格(ge)：分析標準品,≥99.5%(GC)
人(ren)急性(xing)母細胞性(xing)白(bai)血病細胞;MOLT-4（標準品）Budesonide質量規格：HPLC>98%,標準(zhun)品

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆蟲細胞裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 亞(ya)鈣Calcium Folinate質量規格：>98%，水合物,BR

CM-H110人皮(pi)膚肥大(da)細(xi)胞*培養(yang)基100mL亞鈣(gai)（標準(zhun)品）Calcium Folinate質量規格：>98%,含量測定

5-8F, 人高轉移(yi)鼻咽癌(ai)細胞系 瘤,EL4IL-2細胞 PC-12(大(da)鼠腎上(shang)腺嗜(shi)鉻細(xi)胞瘤(liu))Camptothecin質量(liang)規(gui)格：> 99%,喜(xi)樹提取

小鼠漿細胞瘤(liu);MPC-11（標(biao)準品）Camptothecin質(zhi)量規格(ge)：HPLC≥99%,標準品
片姜黃探針(zhen)法PCR鑒定試劑盒說明書(shu)CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白(bai) (His 標簽(qian))偏釩(fan)酸鈉(na)shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：0.25毫升(sheng)

MCF-7(人(ren)癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細胞裂(lie)解液 (陽性對(dui)照) 2,5-二溴(xiu) 2,5-Dibromopyridinq 64-8-

貓腎細胞;CRFK正shēng huà shì jì容量(liang)：100克

人顱(lu)骨(gu)造骨(gu)細胞 (HCO) ( 5×105 )馬丁肉湯shēng hu
實驗流(liu)程：
1. 整(zheng)個(ge)檢測(ce)過程應嚴(yan)格按照本說明(ming)書(shu)要求分別在試(shi)劑準備區(qu)、樣本處理區(qu)和(he)PCR擴增區進行操(cao)作，各(ge)區實(shi)驗服(fu)、儀器 、耗(hao)材應(ying)獨立使(shi)用(yong)(yong)，不能(neng)混用(yong)(yong)；實(shi)驗用(yong)(yong)吸(xi)頭采用(yong)(yong)帶濾(lv)芯吸(xi)頭；樣(yang)本處理區(qu)應(ying)配有生(sheng)(sheng)物安(an)(an)全(quan)(quan)柜，樣(yang)本處理在生(sheng)(sheng)物安(an)(an)全(quan)(quan)柜中(zhong)進(jin)行(xing)操作；三個區(qu)應(ying)該配有紫(zi)外線(xian)殺(sha)菌裝(zhuang)置。
2. 為避免RNA降(jiang)解，樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)應在0-4℃條件下(xia)操作，且完成實(shi)驗后立即上機檢(jian)測(ce)；樣本(ben)處(chu)理過(guo)程中使(shi)用的器具(ju)耗(hao)材應(ying)經過(guo)無核酶處(chu)理。

3. 每次實驗(yan)應(ying)該(gai)設置(zhi)陰、陽性對(dui)照。
4. 試劑盒所有試劑在(zai)使用前應該在(zai)常(chang)溫(wen)下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nei)所配陰性(xing)和陽性(xing)對照在(zai)一(yi)次(ci)使用前應全部轉移至標(biao)本準備區，并(bing)單獨存放。
6. 為防(fang)止熒光干擾，應避免裸手直(zhi)接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反應(ying)管，并應(ying)避免在PCR反(fan)應管上進行(xing)任何標記。
7. 儀(yi)器 擴增(zeng)相關(guan)(guan)參數(shu)應按照(zhao)本說明書相關(guan)(guan)要求進行設(she)置；不同批號試劑(ji)不能(neng)混用。
8. ABI系列熒光(guang)定量PCR儀參數設置(zhi)中不選ROX校正(zheng)，淬滅基因選擇None。
9. 實(shi)驗過程中產(chan)品(pin)的(de)廢棄物應該進行(xing)無害化處理后方可丟(diu)棄。