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菟絲子PCR鑒定試劑盒說明書

更新時間:2023-11-07

簡要描述:

菟絲子PCR鑒定試劑盒說明書公司相關產品CD166 / ALCAM (表達載體), 帶His標簽甲狀旁腺激素PTH1-84shēng huà shì jì容量:1公斤
CD166 / ALCAM (表達載體), 無標簽鄰苯二酸酐10毫克2~8℃
ALDH1A1 甲基-α-D-吡喃半乳糖苷shēng huà shì jì容量:100克
人源ALDH1A3 基(ji)因cDNA克隆

儲存(cun)條(tiao)件:
14℃或-20℃樣品收集(ji)、處理及保存方法
1. 血清:使用不含(han)熱原和內毒素的(de)試管,操作過程中避免任何(he)細胞(bao)刺(ci)激,收集血液后(hou),3000 轉離心10 分(fen)(fen)鐘將血清和紅(hong)細胞迅(xun)速小心地分(fen)(fen)離(li)。
2. 血漿:EDTA、檸檬(meng)酸鹽或肝(gan)素抗凝。3000 轉離心30 分鐘(zhong)取上清。
3. 細(xi)胞上清液:3000 轉離心10 分(fen)鐘去除顆(ke)粒和聚合物。
4. 組織(zhi)勻漿:將組織(zhi)加(jia)入適(shi)量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收(shou)集(ji)后(hou)不及時檢測(ce),請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免(mian)反復凍融,在(zai)室溫下解凍并確保樣品均(jun)勻地充分(fen)解凍。

產品名稱

菟絲子PCR鑒定試劑盒(he)說明書

英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng)

cuscutae

貨號

BH-P99937

特點:
1. 即開即用,用戶只需(xu)要提供病毒(du)樣品。
2. 根據地黃(huang)保守(shou)序(xu)列設計的專(zhuan)一性引物(wu),與相關病(bing)毒(du)無(wu)交叉反應(ying)。
3. 靈敏(min)度可以(yi)達到幾百拷(kao)貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(ce),避(bi)免(mian)后續(xu)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應體系(xi)的熒光定量 PCR
6. 本(ben)產品只(zhi)適用(yong)于科(ke)研,不能用(yong)于臨床診斷。

使用方法:
一、樣品采(cai)集:
1、食(shi)品樣(yang)(yang)品:樣(yang)(yang)品的采集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)(yang)按照(zhao)樣(yang)(yang)品的采集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)(yang)按照(zhao)《食(shi)品衛(wei)生微生物學(xue)檢驗阪(ban)崎腸桿菌檢驗要求進行(xing)。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸(ning)檬酸鈉)抗(kang)凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅(mie)菌(jun)的收集(ji)管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fa)病部位新鮮(xian)滲出物、粘(zhan)液(ye)膿血送(song)檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 6 10 倍(bei)稀釋度為(wei)例)
1. 注(zhu)意:由于標(biao)準(zhun)品濃(nong)度非常(chang)高,因此(ci)下列稀(xi)釋(shi)操作一定要(yao)在獨立的區(qu)域(yu)進行,千萬不能污染(ran)樣(yang)品或本(ben)試劑(ji)盒(he)的其他成(cheng)分(fen))。為增加產品穩定性(xing)和避免擴散傳染(ran)性(xing)病原,本(ben)產品不提供(gong)活體(ti)樣(yang)品做陽(yang)性(xing)對照,只(zhi)提供(gong)可以直接使用的 DNA段作(zuo)為(wei)陽性對照。
2. 標記 6 個(ge)離(li)心管,分別(bie)為 765432
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭(tou),下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照,充(chong)分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘,得1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性對照。放(fang)冰(bing)上待用。
5. 換槍頭(tou),在 6 號管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽性對照(上步稀(xi)釋所得(de)),充分震蕩 1 分鐘,得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性對照到 5 號管中(zhong),充(chong)分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的陽性對照。放冰上待(dai)用。
7. 重復上面的操作直到得(de)到 6 個稀(xi)釋度的陽性對照。放(fang)冰上待用。
注:上(shang)述樣品建議經過增(zeng)菌后,收集培養物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽(chou)提液,按(an)以下說明進行DNA核(he)酸的(de)粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產的(de)DNA提取試劑盒(過柱法(fa)-熒光配套(tao))或其他合適的商業化產品,并(bing)按照(zhao)相應(ying)試劑盒說明(ming)進行(xing)操(cao)作。
1、液體(ti)培(pei)養物:取液體(ti)培(pei)養物100μL加到(dao)1.5mL無(wu)菌(jun)離心管(guan)中,8000rpm離心3min,盡(jin)量吸棄上清,加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離(li)心3min,取上(shang)清5μL進行PCR反應(ying)。
2、固體培養物:挑取單(dan)克隆(long)菌(jun)落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心(xin)3min,取上清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘(zhong),棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提(ti)液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取(qu)上清5μL進行PCR反應(ying)。
4、其他液體(ti)標(biao)本:取標(biao)本2-3mL13000rpm離心3min,棄(qi)上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒(heng)溫10min13000rpm離心(xin)3min取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
注:陽性對(dui)照和(he)陰性對(dui)照為已(yi)經抽提(ti)好的核酸(suan)(無需提取),直接取5μL加(jia)入(ru)(ru)到反應(ying)體系中即可。由于陽性(xing)對照濃度較(jiao)高,建議在樣品制備區域加(jia)入(ru)(ru)陽性(xing)對照。
IL7R Others Human IL7Ra / CD127 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性對照) (標準品)Cefuroxime axetil質量規格:效價測定(ding)

小(xiao)鼠海馬神經(jing)膠(jiao)質細胞(bao)(EGFP標記)G鉀鹽Penicillin G, potassium salt 質(zhi)量(liang)規格:>1500U/mg,USP,BR

LIF Others Human LIF 人細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照) G(標準品)Penicillin G, potassium salt 質量規格:效價測定

人結膜成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞RNAHConF miRNA5 μgErdosteine質量規格:>98.5%

SK-RC-42細(xi)胞,人腎癌細(xi)胞 鼠肝癌細胞系,MM45T.Li細胞(bao) 人(ren)間充質干細胞(bao)-臍(qi)帶鹽(yan)酸(suan)藥根堿(標準(zhun)品)Jatrorrhizine 質(zhi)量規格:HPLC>98.0%,標準(zhun)品
FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細胞裂解液 (陽性(xing)對照) D-果糖-1,6-二(er)1酸三鈉鹽D-Fructose 1,6-bisphosphate  salt質量規格:>98%,BR

平滑肌細胞培養基SMCM-sfD-果糖(標準品)D-Fructose質量規格:HPLC98%,標準(zhun)品

GADD45A Others Human 人(ren) GADD45A / DDIT-1 桿狀病(bing)毒-昆蟲細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對照) 果糖(標準品)Fructose質量規格:HPLC98%,標準品

;HEL哈巴俄苷(標準品(pin))Harpagoside質量規(gui)格:HPLC98%,標準(zhun)品

P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞(bao),骨髓瘤細胞(bao) 人(ren)結腸癌(ai)細胞,SW620細胞 CM-H053人平滑(hua)肌(ji)細胞*培養基(ji)100mL哈(ha)巴苷(標準品(pin))Harpagide質量規(gui)格:HPLC98%,標(biao)準(zhun)品
表達SV40T和(he)EBNA1的人(ren)胚腎細(xi)胞;293ET5-O-去甲多(duo)奈哌(pai)齊質量規(gui)格:美(mei)國進口5-O-Desmethyl Donepezil

KC細胞(bao),人腎癌細胞(bao) 小鼠腦神經(jing)瘤(liu)細胞,Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細(xi)胞 CL-0373KiMA(人胚腎上皮(pi)細(xi)胞系)5×106cells/瓶×2二氫(qing)多奈哌(pai)齊(非對映(ying))質量規格(ge):美國進口(kou)Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)

BGC-803(人胃癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2Dehydrodeoxy多(duo)奈哌(pai)齊(qi)(多(duo)奈哌(pai)齊(qi)雜質)質量(liang)規格:美國(guo)進口Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)

HWP-c subcutaneous 人類白前(qian)脂肪(fang)細胞(HWP)皮下(xia) 500,000cells 人成纖維細胞HLF脫氧質量規格:美國進口Deoxy Donepezil

615小鼠狀(zhuang)肺腺(xian)癌瘤(liu)株;P615鹽酸(suan)地芬尼多(duo)雜質(1化合物)(標準品)質(zhi)量規格:供檢查用(yong)Alkene
菟絲子(zi)PCR鑒定試劑盒說明書HBZY-1(大鼠腎(shen)小球系膜細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2硅膠板H500毫克28

ASGR1 Others Mouse 小鼠 ASGPR1 / ASGR1 人細胞裂解液(ye) (陽性對照) 5-溴(xiu)-4--3-吲哚鱗醋酯隊本安(an)鹽(yan) (BCIP)(-20) 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphctq p-toluidinq sclt 6278-6-9

人(ren)胚(pei)胎,皮(pi)膚,肌肉;M-22FMOC-L-谷酰胺25克(ke)

PPARG Others Human PPARG / Nr1c3
實驗流程:
1. 整個(ge)檢測(ce)過程應(ying)嚴(yan)格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和(he)PCR擴增區進行操作,各區實(shi)驗服、儀器 、耗材應(ying)(ying)獨立使用(yong),不能(neng)混(hun)用(yong);實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭(tou)采用(yong)帶濾芯吸(xi)頭(tou);樣本處(chu)理區應(ying)(ying)配有生物安全柜(ju),樣本處(chu)理在(zai)生物安全柜(ju)中進行操作;三個區應(ying)(ying)該配有紫外(wai)線殺菌裝(zhuang)置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理(li)過(guo)程(cheng)應(ying)在0-4條件下操作,且完成實驗后立(li)即上(shang)機檢測;樣(yang)本處理過程中使(shi)用的器具耗材應經過無核(he)酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性(xing)對照。
4. 試劑盒(he)所有試劑在使用前應該在常溫下充分(fen)融化混勻,并應瞬(shun)時離心。
5. 試劑盒內所配陰性(xing)和陽性(xing)對照在一次使(shi)用前應全部轉移至標(biao)本準備區,并單(dan)獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手(shou)直接接觸PCR反應管,并應避(bi)免在PCR反應(ying)管上進(jin)行(xing)任(ren)何標記。
7. 儀器(qi) 擴增相關(guan)參數應按(an)照本(ben)說明(ming)書相關(guan)要求進行設(she)置;不(bu)同批(pi)號試劑(ji)不(bu)能混用。
8. ABI系列(lie)熒光定量(liang)PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基(ji)因選擇None
9. 實(shi)驗過程(cheng)中產品的廢棄(qi)(qi)物(wu)應該進行無害化處理(li)后方可丟棄(qi)(qi)。

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