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靈芝探針法PCR鑒定試劑盒說明書

更新時間:2023-11-07

簡要描述:

靈芝探針法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關產品 Iron(II) D-gluconate -雙岐桿菌鑒定 20支
水合物699014-53-4 Iron(II) D-gluconate hydrate 麥康凱瓊脂添加劑 Sorbitol MacConkey Agar Additives 1ml*5
2-[雙(shuang)(2-羥(qian)(qian)乙基(ji))氨基(ji)]-2-(羥(qian)(qian)甲基(ji))-1,3-鹽(yan)

實(shi)驗(yan)流程:
1. 整(zheng)個檢測過程應嚴格按(an)照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增(zeng)區進行操作(zuo),各(ge)區實(shi)驗服(fu)、儀器(qi) 、耗材應(ying)獨(du)立使用(yong)(yong),不能混用(yong)(yong);實驗用(yong)(yong)吸(xi)頭(tou)采用(yong)(yong)帶(dai)濾芯吸(xi)頭(tou);樣(yang)本(ben)處理區(qu)應(ying)配有(you)生物安(an)(an)全(quan)(quan)柜,樣(yang)本(ben)處理在(zai)生物安(an)(an)全(quan)(quan)柜中進行操(cao)作(zuo);三個區(qu)應(ying)該配有(you)紫(zi)外線殺菌裝(zhuang)置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理(li)過程應在0-4℃條件下(xia)操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本(ben)處理過程中使用的器具耗(hao)材應(ying)經(jing)過無核(he)酶(mei)處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照(zhao)。
4. 試(shi)劑盒(he)所有試(shi)劑在使(shi)用前應(ying)該(gai)在常溫下充分(fen)融(rong)化(hua)混勻,并應(ying)瞬時(shi)離心。
5. 試劑盒內所配陰性(xing)和陽(yang)性(xing)對(dui)照在一次使用前(qian)應全部轉移至標(biao)本準備區,并單獨(du)存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直(zhi)接(jie)(jie)接(jie)(jie)觸PCR反應管(guan),并應避免在PCR反(fan)應管上(shang)進行任何標記。
7. 儀器 擴增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應按照本說明書相(xiang)關要(yao)求進(jin)行設置;不同批號試(shi)劑不能混用。
8. ABI系列熒光定(ding)量PCR儀參數設置中不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正,淬滅基因選擇None
9. 實(shi)驗過程中產品的廢(fei)棄物(wu)應(ying)該(gai)進(jin)行(xing)無害化處理后方可(ke)丟棄。

產品名稱

靈芝探針法PCR鑒定試劑(ji)盒(he)說明(ming)書

英文名稱

Ganoderma

貨號(hao)

BH-P99369

特點:
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong),用(yong)戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據地(di)黃保守序列(lie)設(she)計的專一性引物,與相(xiang)關病毒無交叉反應(ying)。
3. 靈敏度(du)可以達到(dao)幾百拷貝/反應(ying)。
4. 一管式熒光(guang)定量 PCR 檢(jian)測,避免(mian)后續(xu)污染。
5. 本試劑(ji)盒(he)足夠(gou) 50 20μL 反應(ying)體系的熒光(guang)定量 PCR
6. 本產品只適(shi)用(yong)于科研,不(bu)能(neng)用(yong)于臨床診斷(duan)。
使用(yong)方法(fa):
一、樣品采集:
1、食品樣(yang)(yang)品:樣(yang)(yang)品的采(cai)集(ji)與(yu)預培(pei)(pei)養(yang)按照樣(yang)(yang)品的采(cai)集(ji)與(yu)預培(pei)(pei)養(yang)按照《食品衛生微(wei)生物學檢驗(yan)阪崎腸桿(gan)菌檢驗(yan)要求進行。
2、血(xue)液樣品:用無菌注射(she)器抽取受檢者靜脈(mo)血(xue)2mL,注入無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸檬酸鈉)抗(kang)凝管,立即混(hun)勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅(mie)菌的收集管中(zhong)送檢。
4、病灶部(bu)位(wei)樣品:取發病部(bu)位(wei)新(xin)鮮滲(shen)出物(wu)、粘液膿血送檢(jian)。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度(du)為(wei)例)
1. 注意:由(you)于(yu)標(biao)準品濃(nong)度非常高,因此下(xia)列稀釋操作一(yi)定(ding)要(yao)在獨立的(de)區域進行,千萬不(bu)能污染樣(yang)品或(huo)本試劑盒的(de)其他成分)。為增加產品穩定(ding)性和避免(mian)擴散傳染性病原,本產品不(bu)提供活體樣(yang)品做陽性對照(zhao),只提供可以直(zhi)接使用(yong)的(de) DNA段(duan)作為陽(yang)性對照。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離心管(guan),分別為 765432
3. 用帶芯(xin)槍頭分別加入 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模板稀釋液(ye)(用(yong)帶芯槍頭,下(xia)同(tong))。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的陽性(xing)對照(zhao),充分震(zhen)蕩 1 分鐘,得(de)1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(zhao)。放(fang)冰上待(dai)用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀(xi)釋所(suo)得(de)),充(chong)分震蕩 1 分(fen)鐘,得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭(tou),在(zai) 5 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽性對照到 5 號管中,充(chong)分震蕩(dang) 1 分鐘,得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面(mian)的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
注:上述(shu)樣品建議(yi)經過增菌后,收集培養物(wu)用于檢測。
二、DNA提取(qu):
可(ke)采(cai)用PCR試劑(ji)盒配備的DNA抽提液(ye),按(an)以下說明進行DNA核酸的(de)粗提。也(ye)可采購上海澤葉(xie)生(sheng)物(wu)科技有限公司(si)生(sheng)產的(de)DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或(huo)其他合適的商(shang)業化(hua)產品,并按照相(xiang)應試劑(ji)盒說明進行操作(zuo)。
1、液(ye)體(ti)培(pei)(pei)養物:取液(ye)體(ti)培(pei)(pei)養物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌離心管中,8000rpm離心3min,盡(jin)量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分(fen)混勻(yun),100℃恒溫(wen)10min13000rpm離心3min,取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反應。
2、固體(ti)培養物:挑取單克隆菌(jun)落與50μL DNA抽提(ti)液充分混勻,100℃恒(heng)溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便(bian)樣品:挑取米粒大(da)小糞便(bian)于滅菌離心(xin)管中,加(jia)入0.5mL生理鹽水(shui),振蕩混(hun)勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀(dian)中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清(qing)5μL進行PCR反(fan)應。
4、其他(ta)液體標本:取(qu)標本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清(qing),沉淀中加入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混勻,100℃恒溫(wen)10min13000rpm離心(xin)3min取上清(qing)5μL進(jin)行PCR反應。
注:陽(yang)性對照和陰性對照為已經抽提好的核酸(無需提(ti)取),直接(jie)取5μL加入到反應體系(xi)中即可。由于陽(yang)性對照濃度(du)較高,建(jian)議在樣(yang)品制備區域加入陽(yang)性對照。
Hacat(
人(ren)永(yong)生(sheng)化角質(zhi)形成細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0352HFF-1(人成纖維(wei)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 白牦(mao)牛(niu)皮膚細胞;Yak-2天青石藍(lan)Celestine blue質量規格:BS

小(xiao)鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9天青(qing) B 曙(shu)紅Azure B eosinate質量規格:sigma分裝

TMED1 Others Human TMED1 人(ren)細胞裂解液 (陽性對(dui)照) 利馬前列素Limaprost質(zhi)量規(gui)格:>99%

人腸微血(xue)管內皮細胞*培養基 100mL天青II曙紅Azure II eosinate質量規(gui)格(ge):BS

AMS2細胞,人干細胞因子單(dan)克隆抗體(ti)細胞株 阪崎腸(chang)桿菌 大耳山(shan)羊皮(pi)膚細胞;LDG-3菲律賓(bin)菌素;非律平;FilipinFilipin complex from Streptomyces filipinensis質量(liang)規格:sigma分裝(zhuang)
HKC(人胚(pei)腎上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 小腸(chang)結(jie)腸(chang)炎(yan)耶爾森氏菌(jun)BES free acid; N,N-(2-羥乙基(ji))-2-氨基乙磺酸BES free acid質量規格:>99%

內皮細胞生長(chang)添加物ECGSCEP-18770CEP-18770質量規格:>98.5%

CLEC12A Others Human CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 人細胞裂解液 (陽性對(dui)照) 地馬(ma)格列Managlinat Dialanetil/CS-917質量規格:>98.5%,BR

CSSTSP1 中(zhong)華鱉脾來(lai)源(yuan)細胞(bao)鹽酸諾拉曲(qu)噻(sai)latrexed di質(zhi)量規格:>99%,BR,可用于細胞培養(yang)

CM-M124小鼠脈絡膜血管(guan)細(xi)胞*培養基100mLPD 173074PD 173074質量規格:>98%,BR,可用于細胞培養
TNFRSF17 Others Human TNFRSF17 / BCMA / CD269 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對照) 黃(huang)芪多糖(50%)質量規格(ge):>50%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole

小鼠胚胎成纖維細(xi)胞;3T6-Swiss albi黃(huang)芪多糖(30%)質量規(gui)格:>30%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole

SAE1 Others Human SAE1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對照) 3-奎寧環酮(tong)鹽酸鹽質量(liang)規格(ge):>98%3-Quinuclidine HCl

QGY-7701, 人肝(gan)癌細胞伊(yi)索拉定質量規格:≥99%,BRIrsogladine

NSC,大鼠神經干細胞 人腦視(shi)神經膠(jiao)質瘤(liu)細胞(bao),Hs 683細胞 RF/6A(猴脈(mo)絡(luo)膜-視(shi)網膜(內皮)細胞)黃柏(bo)酮(標準(zhun)品)質(zhi)量規格:HPLC98%,標準品Obacune
靈芝探(tan)針法PCR鑒定(ding)試劑盒說明書PDIA4 Others Human 人(ren) ERP72 / PDIA4 人細胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) Camphore2-莰(kan)酮100CP96%

C57BL/6小鼠(shu)骨髓間質(zhi)干細胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells芐基三基錄化銨;三(san)基(ji)(ji)下基(ji)(ji)錄化銨 BqnzyltriMqthylcMMoniuM chloridq 26-93-9

HME6細(xi)胞,人色素瘤細(xi)胞 動物雙歧(qi)桿菌 EB病毒轉化的(de)人B細胞;KMY0919 10B Naphthol Blue Bl
儲存條件:
14℃或(huo)-20℃樣品收集、處理及保(bao)存方法(fa)
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的(de)試管,操作(zuo)過程中避(bi)免任何(he)細胞(bao)刺激,收(shou)集(ji)血液后,3000 轉(zhuan)離心10 分鐘將(jiang)血清(qing)和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血(xue)漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗(kang)凝。3000 轉離心30 分鐘(zhong)取上清。
3. 細胞上清(qing)液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和(he)聚(ju)合物。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿:將組織(zhi)加入適量生理(li)鹽水(shui)搗碎。3000 轉離心10 分鐘(zhong)取(qu)上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量(liang)分裝,凍存于-20℃,避免反復凍(dong)融,在室溫下解凍(dong)并確保(bao)樣品均(jun)勻(yun)地充分(fen)解凍(dong)。

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