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柴胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書

更新(xin)時間:2023-11-07

簡要描述:

柴胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關產品大戟因子L1 Euphorbia?factor?L1 大戟因子L1 Euphorbia?factor?L1 76376-43-7 分子式:C32H40O8 分子量:552.70
山(shan)椒子(zi)(zi)烯醇 Zeylenol 山(shan)椒子(zi)(zi)烯醇 Zeylenol 78804-17-8 分子(zi)(zi)式:C21H20O7 分子(zi)(zi)量(liang):384.40

特點:
1. 即(ji)(ji)開即(ji)(ji)用,用戶只需(xu)要提供(gong)病毒樣品(pin)。
2. 根據(ju)地(di)黃(huang)保守序列(lie)設計的專(zhuan)一性引物,與相關(guan)病毒無交(jiao)叉反應。
3. 靈敏(min)度可以達到幾百(bai)拷貝/反應。
4. 一(yi)管式熒光定(ding)量 PCR 檢(jian)測(ce),避(bi)免后續(xu)污(wu)染。
5. 本試(shi)劑盒足(zu)夠 50 20μL 反應(ying)體系的熒光定量 PCR
6. 本(ben)產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產品名稱

柴胡染料(liao)法PCR鑒定試劑盒說明書

英(ying)文(wen)名稱

bupleuri

貨號

BH-P99605

使用方法:
一(yi)、樣品采集:
1、食品(pin)樣品(pin):樣品(pin)的采集與(yu)預培養按照(zhao)樣品(pin)的采集與(yu)預培養按照(zhao)《食品(pin)衛生微生物學檢驗(yan)阪崎腸桿菌檢驗(yan)要求進行。
2、血液樣(yang)品:用(yong)無菌(jun)注射器抽取受(shou)檢者(zhe)靜(jing)脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝(ning)管,立即混(hun)勻。
3、糞(fen)便(bian)樣品(pin):取糞(fen)便(bian)置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液(ye)膿(nong)血(xue)送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例(li))
1. 注意:由(you)于(yu)標(biao)準品(pin)(pin)濃度(du)非常高,因此下列稀釋操作一(yi)定要在獨(du)立的區域(yu)進行,千萬不(bu)能污染樣品(pin)(pin)或(huo)本試劑盒的其他成分)。為(wei)增(zeng)加產品(pin)(pin)穩定性(xing)和避免擴散傳染性(xing)病原,本產品(pin)(pin)不(bu)提(ti)供活體樣品(pin)(pin)做陽(yang)性(xing)對照(zhao),只提(ti)供可以(yi)直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記(ji) 6 個離心管,分別為 765432
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)分別加(jia)入 45 μL 熒光(guang) PCR 模板稀釋液(ye)(用(yong)帶芯槍頭,下(xia)同(tong))。
4. 7 號管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭(tou),在 6 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩(dang) 1 分鐘,得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待(dai)用。
6. 換(huan)槍頭,在 5 號(hao)管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照到 5 號管(guan)中,充分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘,得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上(shang)面(mian)的操作直到(dao)得到(dao) 6 個(ge)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上(shang)述(shu)樣品建議經(jing)過(guo)增菌(jun)后,收集培(pei)養(yang)物用(yong)于檢(jian)測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以(yi)下說明進行DNA核(he)酸的粗提。也可采(cai)購上海(hai)澤葉(xie)生(sheng)(sheng)物科技有(you)限公司生(sheng)(sheng)產的DNA提取(qu)試劑盒(過柱法-熒光配(pei)套)或其(qi)他合適的(de)商業化產品,并按(an)照相應試劑盒說明進行(xing)操作。
1、液(ye)(ye)體(ti)培養物:取液(ye)(ye)體(ti)培養物100μL加到1.5mL無菌離心管(guan)中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上(shang)清,加(jia)入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫(wen)10min13000rpm離心(xin)3min,取上清5μL進行PCR反應(ying)。
2、固體培(pei)養物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻,100恒溫10min13000rpm離(li)心3min,取上清(qing)5μL進行PCR反應。
3、糞便(bian)(bian)樣(yang)品:挑取(qu)米粒大小糞便(bian)(bian)于滅(mie)菌離心管中,加入0.5mL生理(li)鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分(fen)混勻,100恒(heng)溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反(fan)應。
4、其(qi)他液體(ti)標本:取(qu)標本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混勻,100恒(heng)溫(wen)10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
注:陽(yang)性(xing)對照(zhao)和(he)陰性(xing)對照(zhao)為已(yi)經抽提好的核酸(無(wu)需提取),直(zhi)接取(qu)5μL加入到反應體(ti)系中即可。由于陽(yang)性對照(zhao)濃度(du)較高,建議在樣品(pin)制備區域加入陽(yang)性對照(zhao)。
實驗流(liu)程:
1. 整個(ge)檢(jian)測過程應嚴格按照本說(shuo)明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴(kuo)增區(qu)進行操作,各區(qu)實驗(yan)服、儀器 、耗材應(ying)獨(du)立使用,不(bu)能混用;實驗用吸(xi)頭采用帶(dai)濾芯吸(xi)頭;樣(yang)(yang)本(ben)處(chu)理(li)區(qu)應(ying)配有生物(wu)安全柜,樣(yang)(yang)本(ben)處(chu)理(li)在生物(wu)安全柜中(zhong)進行(xing)操作;三個區(qu)應(ying)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解(jie),樣本處理過程應在0-4條件(jian)下操(cao)作,且完成(cheng)實(shi)驗后立即上機檢測;樣本處理過(guo)程中使用(yong)的器具耗(hao)材應經(jing)過(guo)無核酶處理。
3. 每次實驗應(ying)該設置陰、陽性(xing)對照。
4. 試(shi)劑(ji)盒所有試(shi)劑(ji)在使(shi)用前應(ying)該在常溫下充分融(rong)化混勻,并應(ying)瞬時離心(xin)。
5. 試劑(ji)盒內所(suo)配陰性(xing)和陽性(xing)對(dui)照在一(yi)次使用前應全部轉(zhuan)移至標本準(zhun)備區,并(bing)單獨存放。
6. 為(wei)防(fang)止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shu)應按照本說(shuo)明書相關要求(qiu)進行設置;不同批號(hao)試劑(ji)不能混用。
8. ABI系列熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數設置中(zhong)不(bu)選ROX校正,淬滅基因選擇None
9. 實驗過程中產(chan)品的廢棄物應該進(jin)行無害化處理(li)后方可(ke)丟棄。
儲存條(tiao)件:
14或(huo)-20樣品收集、處(chu)理及保(bao)存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒(du)素的試管,操作(zuo)過程(cheng)中避(bi)免任何細胞刺激,收集血液后(hou),3000 轉離心(xin)10 分(fen)(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清(qing)和紅細胞迅速小心(xin)地分(fen)(fen)離。
2. 血漿:EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離(li)心30 分鐘取(qu)上清。
3. 細胞上(shang)清液:3000 轉離心(xin)10 分鐘去除(chu)顆粒和聚合物。
4. 組(zu)織(zhi)勻漿:將組(zu)織(zhi)加入(ru)適(shi)量生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分鐘取上(shang)清(qing)。
5. 保存(cun):如(ru)果(guo)樣本收集后不及時檢測,請按(an)一(yi)次用量分裝(zhuang),凍(dong)存(cun)于-20,避(bi)免反復(fu)凍融,在(zai)室溫下解凍并確保樣品均勻地(di)充(chong)分解凍。
GH3, 大鼠(shu)垂(chui)體(ti)生長(chang)激(ji)素腺瘤莫吉司坦Moguisteine質量規格(ge):>98%,BR

大鼠主動脈平滑肌細胞莫吉司(si)坦(tan)(標準品(pin))Moguisteine質量(liang)規格(ge):HPLC>98%,標準品(pin)

人惡性(xing)非霍(huo)奇金瘤患(huan)者的自然殺傷(shang)細(xi)胞;NK-92 [NK92] 人胰(yi)島β細胞*培養基(ji) 100mL糠(kang)酸莫米Mometasone furoate質量規(gui)格:>98%,USP31

人(ren)永生化細胞;CNLMG-B5537LC糠酸莫米(標準品)Mometasone furoate質量規(gui)格:HPLC>98%,標準品(pin)

GDNF Others Rat 大鼠(shu) GDNF 桿狀病毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性對照) 納他霉素,匹馬(ma)霉素,,游霉素Natamycin,Pimaricin質量(liang)規格:>90%,BR
斑馬魚尾(wei)鰭細胞;AB.9 人肝(gan)癌細胞,SNU-182細胞(bao) HEp-2(喉表皮樣(yang)癌細胞)硫酸(suan)鈰四(si)水(shui)(>99%BR)Cerium(IV) sulfate tetrahydrate質(zhi)量規格:>99%,BR

人(ren)腦(nao)瘤細(xi)胞;SF126碳酸銫(se)(>99%BR)Cesium carbonate質量(liang)規格:>99%,BR

TLR3 Others Mouse 小鼠(shu) TLR3 / CD283 人細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照) 1,1-環丙基乙二羧酸1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid質量規格(ge):>98%

非(fei)洲綠(lv)猴腎細胞;VEROTAPSN-三(san)(羥甲基)甲(jia)基-3-氨基丙磺酸TAPS質量規格(ge):>99%,細胞培養級(ji)

ACVR1B Others Rat 大鼠(shu) ACVR1B / ALK-4 人細胞裂解液 (陽性對照) PI3K 抑制(zhi)劑(ji)LY294002質量規格:>98.5%,進分
IL2RA Others Human IL2Ra / CD25 人細胞裂(lie)解液 (陽性對照) (標準品)質(zhi)量(liang)規格:含量(liang)測定S-Carboxymethyl-L-cysteine

脂肪細胞培養(yang)基(ji)AdM(標準(zhun)品)質量規格:含量測定Isosorbide dinitrate

CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人細胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) ;氮酮質(zhi)量規格(ge):>97%Laurocapram

大(da)鼠胰(yi)島細(xi)胞*培養基(ji) 100mL(標準品)質量規(gui)格:含量測(ce)定Oxymetazoline

MLE-12小(xiao)鼠肺上皮細胞(bao)株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS雙壁碳納米(mi)管(>50%) 小于5nm(直徑),5-15μm(長度)質量規(gui)格:Carbon Natube Double-walled (>50%) below 5nm(diam.), 5-15µm(length)
柴(chai)胡染料法PCR鑒定試劑盒(he)說(shuo)明(ming)書DDR2 Others Cymolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細胞裂解液 (陽性(xing)對照) BariumChorideDihydrate錄化鋇二水ACS級白色晶體粉(fen)末(mo)RTsigma

貓腎細胞(bao);F813--2-肖基本加醋 3-Mqthyl-2-nitbqnzoic ccid

LTPEP-a-2細胞,人肺腺癌細胞 非洲綠猴(hou)腎細胞,VERO C1008 (E6)細胞 CM-M042小(xiao)鼠直腸(chang)平滑肌細胞*培(pei)養基100mLGUANIDINExy7CHLORIDE鹽酸(suan)胍技術(shu)級白色至微黃色顆粒結晶粉末(mo)R

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