實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指(zhi)在PCR反應(ying)體系(xi)中加(jia)入熒(ying)光基團，利用熒(ying)光信(xin)號(hao)積累實時監測(ce)整個PCR進程，通(tong)過(guo)標(biao)準曲(qu)線對(dui)未知模(mo)板進行(xing)定(ding)量分析的方法。實時熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR的(de)(de)化(hua)學原(yuan)理包(bao)括(kuo)探針(zhen)(zhen)(zhen)類(lei)和非探針(zhen)(zhen)(zhen)類(lei)兩類(lei)，探針(zhen)(zhen)(zhen)類(lei)是利用(yong)與靶細胞序列(lie)特(te)異(yi)性雜(za)交的(de)(de)探針(zhen)(zhen)(zhen)來指(zhi)示擴增(zeng)產物的(de)(de)增(zeng)加(jia)，非探針(zhen)(zhen)(zhen)類(lei)是利用(yong)熒光染料或(huo)者(zhe)特(te)異(yi)性設計的(de)(de)引(yin)物來指(zhi)示擴增(zeng)的(de)(de)增(zeng)加(jia)。運用(yong)該(gai)技術可以(yi)對DNA、RNA樣品(pin)進行定(ding)(ding)量(liang)（包括定(ding)(ding)量(liang)和相對定(ding)(ding)量(liang)）和定(ding)(ding)性分析。
主(zhu)要服務：DNA或(huo)RNA的定量分(fen)析、基(ji)因(yin)表達(da)差(cha)異分(fen)析、基(ji)因(yin)分(fen)型。
主要技術：引物設計、RNA提(ti)取(qu)、cDNA合(he)成、qPCR

產品及(ji)特點：
本產品包含Taq DNA聚(ju)合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液，濃度為2×。具有快速簡便、靈(ling)敏度高(gao)、特(te)異性強、穩定性好等優點，可大限(xian)度的減少人為誤差(cha)。使用時(shi)只需加入(ru)DNA模板和引物既(ji)可。使用方便快捷，能(neng)避免PCR操作過(guo)程中(zhong)的污染(ran)，使用時只需(xu)取適(shi)量2×TaqPCR MasterMix溶液，加(jia)入模板和(he)引物，并加(jia)入去離子水補(bu)足體(ti)(ti)積，使MasterMix溶液濃度(du)為1×即可進(jin)行反(fan)應。使用前請保(bao)證充分溶解(jie)并混勻，操作需在(zai)冰上進(jin)行。本(ben)產品就是為此目的(de)根據(ju) PCR 原理開發的試劑盒。
具有高靈(ling)敏度、高特異性(xing)、高穩定性(xing)
可在同(tong)一(yi)個管子(zi)中高(gao)特(te)異(yi)性的執行cDNA合成與基(ji)于探針的(de)qPCR反應。更多優點如1.的特異性；2.多重反應（高通量）；3.反應體系配置，無需冰塊；4.無懼高GC含(han)量PCR；5.預防交(jiao)叉(cha)污(wu)染；6.廣泛的設備(bei)兼容性。
PCR反應(ying)的特異(yi)性決定因素為：
①引(yin)物與(yu)模板DNA特(te)異正確的結合；
②堿基配對原(yuan)則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(ying)的忠實性；
④靶基因的特異性與(yu)保守(shou)性。
其中引(yin)物與模(mo)板的(de)(de)(de)正確結(jie)(jie)合(he)是關鍵。引(yin)物與模(mo)板的(de)(de)(de)結(jie)(jie)合(he)及引(yin)物鏈的(de)(de)(de)延伸是遵循(xun)堿基配對原則的(de)(de)(de)。聚(ju)合(he)酶合(he)成反應的(de)(de)(de)忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shi)反應中(zhong)模板與引物的結合(復性)可(ke)以在較高(gao)(gao)的(de)(de)溫度(du)下進行(xing)，結合(he)的(de)(de)特(te)(te)異性(xing)大(da)(da)大(da)(da)增加(jia)，被擴增的(de)(de)靶(ba)基(ji)因(yin)片(pian)段也就(jiu)(jiu)能(neng)保(bao)持很高(gao)(gao)的(de)(de)正確(que)度(du)。再通過選擇特(te)(te)異性(xing)和保(bao)守性(xing)高(gao)(gao)的(de)(de)靶(ba)基(ji)因(yin)區，其(qi)特(te)(te)異性(xing)程度(du)就(jiu)(jiu)更高(gao)(gao)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(de)生成量是(shi)以(yi)指數方(fang)式(shi)增加(jia)的(de)，能將皮克(pg=10-12g)量(liang)級的起(qi)始待測模板擴增到微(wei)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞(bao)中(zhong)檢(jian)出一個靶細胞(bao)；在病毒的檢(jian)測中(zhong)，PCR的靈(ling)敏度(du)可達3個(ge)RFU(空斑形成單位)；在細菌(jun)學中(zhong)zui小檢出率為3個(ge)細菌。
(3) 簡(jian)便、快速
PCR反應用耐高溫(wen)的(de)Taq DNA聚合酶，一次(ci)性地(di)將反應液加好后，即(ji)在DNA擴增液和水(shui)浴鍋上進(jin)行變性-退火(huo)-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增(zeng)反應。擴增(zeng)產物一般用(yong)電泳(yong)分析(xi)，不一定要用(yong)同位(wei)素，無(wu)放(fang)射性(xing)污染、易推廣。
(4) 對標本的(de)純度要求低(di)
不需要分離病毒或細菌及培(pei)養細胞，DNA 粗制品及總(zong)RNA均可作為(wei)擴增模(mo)板。可直接用(yong)臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛(mao)發、細胞、活PCR技(ji)術概論。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢(jian)測組(zu)織、細(xi)(xi)胞、血液、細(xi)(xi)菌等(deng)很多材(cai)料，不同(tong)的樣本有不同(tong)要求，實驗前(qian)請(qing)充分溝通確認實驗方(fang)案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供(gong)實驗(yan)的(de)(de)背(bei)景信息、物(wu)種、基因準確(que)的(de)(de)名(ming)稱和ID號；
3）客戶盡量不要(yao)提供(gong)DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于(yu)液(ye)氮或干(gan)冰，也可(ke)以保存于(yu)Trizol液(ye)中。
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人(ren)細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 鹽酸羅(luo)沙替丁(ding)醋酸酯(zhi)Roxatidine acetate HCl質(zhi)量規格(ge)：>98%

大鼠平滑肌細(xi)胞(bao)*培養基 100mL酸Pemetrexed質量規格：>98%

CHO-K1倉鼠卵巢(chao)細(xi)胞亞株 CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS酸(suan)(標準品)Pemetrexed質量規(gui)格：HPLC≥98%,標準品

胰島素樣(yang)生(sheng)長因子周效磺胺(an)(磺胺多辛)sulphadoxine質(zhi)量規格：>99%,BR

E.G7-OVA(小(xiao)鼠(shu)T瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人(ren)卵(luan)巢成(cheng)纖維細(xi)胞HOF周效磺胺(標準品)sulphadoxine質(zhi)量規格：HPLC>98%,標準品(pin)
人結(jie)腸平滑肌細(xi)胞(HCSMC)(5×105 )Baclofen質量規格：度>99,USP

CL-0358HKC(人胚腎(shen)上(shang)皮細胞)5×106cells/瓶(ping)×2Amlodipine質量規格：>99.0%,BR

人胰(yi)腺(xian)癌(ai)細胞;AsPC-1 大鼠(shu)皮膚(fu)肥大細胞*培養基(ji) 100mL（標準品）Amlodipine質(zhi)量規格：HPLC>98%,標準品

EMT-6 小鼠癌(ai)Nizatidine質量規格：>98.5%,USP31

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細胞(bao)裂解液 (陽性對照) 羧甲基纖維(wei)素Carboxymethyl cellulose 質量規格：粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s
人心(xin)肌(ji)細(xi)胞-裂解物(wu)HCM-a L2,7-二羥基萘(>98%,BR)質量規格：>98%,BR2,7-Dihydroxynaphthalene

家豬皮(pi)膚(fu)細胞;SSC-S1 癌細(xi)胞，ZR-75-1細胞(bao) NS1細胞，小鼠骨(gu)髓瘤細胞2, 6-二氯醌-4-氯亞胺(>98%,BR)質量規格：>98%,BR2,6-Dichloroquinone-4-chlorimide

腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-2932-金剛烷醇(>99%,BR)質量規格：>99%,BR2-Adamantanol

HA Others H5N1 甲(jia)型流感(gan) H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂(lie)解液 (陽性對(dui)照) 2-金剛烷酮(>99%,BR)質量規格：>99%,BR2-Adamantanone

CL-0160Molt-4(人急(ji)性(xing)母細胞白(bai)血病細胞)5×106cells/瓶×22,2′-雙溴雙苯(ben)(98.0%)質量(liang)規格：0.982,2′-Dibromobiphenyl
薏苡仁(ren)染料(liao)法(fa)PCR鑒定試劑盒直(zhi)銷小鼠子(zi)細胞;U14 小(xiao)鼠肝竇內皮細胞*培養基 100mLMALTEXTRACT麥牙(ya)提取(qu)物細菌(jun)學(xue)級粉末COLD不(bu)sigma

NSC，大鼠神經(jing)干細胞 Rattus3-羌(qiang)基-2-丁同;酰基醇;酰基醇;偶姻(yin) 3-xy7noxy-2-butcnonq;ccqtoin;2,3-Butcnolonq;DiMqthylkqtol;γ-xy7noxy-β-oxobutcnq 213-86-0

F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照) I-INOSITOL肌醇(chun)