實驗流程：
1. 整個檢(jian)測過程應(ying)嚴格按照本(ben)說明書要求分別在試劑準備(bei)區、樣本(ben)處理區和(he)PCR擴增區進行操(cao)作，各區實(shi)驗服、儀器 、耗(hao)材應(ying)獨立(li)使用(yong)，不(bu)能(neng)混用(yong)；實(shi)驗(yan)用(yong)吸頭采用(yong)帶濾(lv)芯吸頭；樣本處(chu)理(li)區(qu)應(ying)配有生(sheng)物安(an)全柜(ju)，樣本處(chu)理(li)在生(sheng)物安(an)全柜(ju)中進行操作(zuo)；三個區(qu)應(ying)該配有紫外線殺菌裝置(zhi)。
2. 為避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解，樣本(ben)處理過程應在(zai)0-4℃條件下操(cao)作，且完(wan)成實驗(yan)后(hou)立即上機檢測；樣本處理過(guo)程(cheng)中使(shi)用的器具耗材應(ying)經過(guo)無核酶處理。
3. 每次實驗應該(gai)設置陰、陽性對照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒所有試(shi)劑(ji)在使用前應(ying)該在常溫下充分融化混勻，并應(ying)瞬時離心。
5. 試劑盒內所(suo)配(pei)陰性(xing)(xing)和陽性(xing)(xing)對照在一次使(shi)用前應(ying)全(quan)部轉移至標本準(zhun)備區，并單獨存(cun)放。
6. 為防止(zhi)熒(ying)光干擾，應(ying)避(bi)免(mian)裸手直接(jie)接(jie)觸PCR反(fan)應管，并應避(bi)免(mian)在PCR反應管上進行任(ren)何(he)標(biao)記。
7. 儀器 擴增相關(guan)參數(shu)應按照本說明書相關(guan)要求(qiu)進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置(zhi)中(zhong)不選ROX校正，淬(cui)滅基因選(xuan)擇None。
9. 實驗(yan)過程中產品的廢棄物應該進(jin)行無害化處理后方可(ke)丟棄。

特點：
1. 即(ji)開即(ji)用，用戶只需要提供(gong)病毒樣品。
2. 根據地黃保守序列設計的專一(yi)性(xing)引物，與相關(guan)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢(jian)測，避免(mian)后(hou)續(xu)污染。
5. 本試劑盒足夠(gou) 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本(ben)產品只適用(yong)于科研，不能用(yong)于臨床診斷。
使用方法：
一、樣品采集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采集與預(yu)培(pei)養按(an)照樣品(pin)的(de)采集與預(yu)培(pei)養按(an)照《食(shi)品(pin)衛生微生物學檢驗(yan)阪崎腸桿菌檢驗(yan)要求進行。
2、血(xue)液樣(yang)品：用(yong)無菌注射器抽取受檢者靜脈血(xue)2mL，注入(ru)無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗(kang)凝管，立即混勻(yun)。
3、糞(fen)便樣(yang)品：取糞(fen)便置(zhi)于滅(mie)菌的(de)收(shou)集管(guan)中送檢。
4、病(bing)(bing)灶部位(wei)樣品：取(qu)發病(bing)(bing)部位(wei)新(xin)鮮滲出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿(nong)血送檢。
一、稀(xi)釋(shi) PCR 陽性對照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因(yin)此下列稀(xi)釋操作一定要(yao)在(zai)獨立(li)的區域進行(xing)，千萬(wan)不(bu)能污染樣(yang)品或本試(shi)劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wen)定性(xing)和(he)避免擴散傳(chuan)染性(xing)病(bing)原，本產品不(bu)提供(gong)活體樣(yang)品做陽性(xing)對照，只提供(gong)可(ke)以直接(jie)使用(yong)的 DNA段作為陽性(xing)對照(zhao)。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離心管，分(fen)別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯(xin)槍頭分別(bie)加入 45 μL 熒光 PCR 模板(ban)稀(xi)釋液（用帶芯槍頭，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的(de)陽性對(dui)照，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放(fang)冰上待用。
5. 換(huan)槍頭(tou)，在 6 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對照(上(shang)步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽性對(dui)照。放(fang)冰(bing)上待用。
6. 換槍頭，在 5 號(hao)管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性對照到 5 號管(guan)中(zhong)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個(ge)稀釋度的陽性對照(zhao)。放(fang)冰上待(dai)用(yong)。
注：上述樣(yang)品建議經過增菌后，收集培養物用于檢測。 
二、DNA提取：
可采用PCR試(shi)劑盒配備的DNA抽提(ti)液，按(an)以下說明(ming)進行DNA核酸的粗提。也(ye)可(ke)采購上(shang)海澤葉生(sheng)物(wu)科(ke)技有限公司生(sheng)產的DNA提(ti)取試劑盒(he)(過柱法-熒光配套)或(huo)其他合適(shi)的(de)商業(ye)化產(chan)品(pin)，并按(an)照相應試劑盒說明進(jin)行操作。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物：取液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物100μL加到1.5mL無菌離(li)心管中，8000rpm離心(xin)3min，盡量吸棄上(shang)清，加入50μL DNA抽提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反應。
2、固體培養物(wu)：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品：挑(tiao)取米(mi)粒(li)大小糞便于滅菌離心管中(zhong)，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分(fen)鐘，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提(ti)液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
4、其他液體標(biao)本(ben)：取標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上清，沉(chen)淀(dian)中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
注：陽性對照(zhao)(zhao)和陰性對照(zhao)(zhao)為(wei)已經抽提好的核酸(suan)(無需提取)，直接取5μL加入到反(fan)應(ying)體(ti)系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議在樣(yang)品制(zhi)備區域加入陽性對照。 
CGB5 Others Human 人 CGB5 人細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照) 莫(mo)索尼定Moxonidine 質量規格：度>99%,BR,可(ke)用(yong)于細(xi)胞培養

家兔骨髓間(jian)充質(zhi)干(gan)細胞;2012083MSC莫索尼定(ding)(標(biao)準(zhun)品)Moxonidine 質量規格：HPLC>98%,標準品(pin)

二氫還(huan)原酶(mei)缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr- 食管癌細(xi)胞，TE-11細胞 B82細(xi)胞，鼠細(xi)胞系奈帕(pa)芬(fen)胺Nepafenac質量規格：>99%,BR

B16-F10, 小鼠色(se)素瘤高(gao)轉移細胞 Mouse奈帕芬胺(標準品)Nepafenac質量規格：>99%,標(biao)準品

SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 人細胞裂解(jie)液 (陽性對照) 尼卡巴嗪 Nicarbazin 質量規格：>98%
LRG1 Others Human 人 LRG1 人細胞裂(lie)解液 (陽(yang)性對照) 并五苯(以(yi)升華法化)Pentacene (purified by sublimation)質量規格(ge)：

眼晶狀體(ti)上皮(pi)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)顏(yan)料藍(lan) 15(以(yi)升華(hua)法化)Pigment Blue 15 (purified by sublimation)質量規格(ge)：>98.0%(T)

Jurkat E6-1細胞，人(ren)T細胞瘤 人癌細(xi)胞,4T1細(xi)胞 上皮(pi)細胞生長添(tian)加(jia)物-2EpiCGS-21,2-(standard for GC, ≥99.5% (GC))1,2-Propanediol質量規格：standard for GC, ≥99.5% (GC)

水牛皮膚(fu)成(cheng)纖維樣細胞(bao);WB-S2正(zheng)十二烷基苯(ben)(analytical standard,≥99.5%(GC))1-Phenyldodecane質量(liang)規格(ge)：analytical standard,≥99.5%(GC)

IL1RN Others Human 人 IL1RA / IL1F3 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽性對照) 2-苯乙(yi)醇(GC,>99.5%(GC))2-Phenylethal質量規(gui)格：GC,>99.5%(GC)
IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照) 葡萄糖-6-1酸脫(tuo)氫酶，硫酸銨懸(xuan)浮液質量規格(ge)：酶活>200 NADP units/mg，BCGlucose-6-phosphate dehydrogenase

CM-H022人前列腺成(cheng)纖維細胞*培養基100mL蘋果(guo)酸脫氫酶(>12,000U/ml，BC)質量(liang)規格：>12,000U/ml，BCMalate dehydrogenase

BBOX1 Others Human 人(ren) BBOX1 / Gamma-BBH 桿狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 草甘膦標準溶液(10μg/ml,u=2%)質量規格：10μg/ml,u=2%N-(Phosphomethyl)glycine solution

支氣管成纖維細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)辛(xin)(分析標準品,99%)質(zhi)量規格：分(fen)析標(biao)準品,99%Phoxim

恒(heng)河猴腎細胞;RM-1 人(ren)胰腺癌細胞，HPAC細胞 SGC-7901(胃腺癌細胞)除草標準(zhun)溶液(10μg/ml,u=5%)質量規格：10μg/ml,u=5%Nitrofen solution
木(mu)香(xiang)PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒說明書人微血管內(nei)皮細(xi)胞RNAHDMEC miRNA5 μgβ-腺嘌呤二核苷酸 3'-1酸鈉鹽水合物質量(liang)規格：美國進口β-Nicotinamide adenine dinucleotide 3'-phosphate  salt hydrate

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對照) 腺嘌呤鹽(yan)酸鹽(yan)質量規格：美國進口Adenine

家兔腎細胞;RABK3硫代腺嘌(piao)呤二核(he)苷酸質量(liang)規格：美國(guo)進(jin)口Thionicotinamide
儲存(cun)條件：
14℃或(huo)－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使(shi)用不含熱原和內(nei)毒素的試管，操作(zuo)過程中避免任何(he)細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分(fen)鐘將血清和紅細胞迅速小(xiao)心地(di)分(fen)離。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離(li)心30 分鐘(zhong)取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物(wu)。
4. 組(zu)織勻漿：將組(zu)織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上(shang)清。
5. 保存：如果(guo)樣(yang)本(ben)收集(ji)后不及時檢(jian)測，請按一(yi)次用(yong)量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫(wen)下(xia)解(jie)(jie)凍并確保(bao)樣品均勻地(di)充(chong)分解(jie)(jie)凍。