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佛手探針法PCR鑒定試劑盒*

更(geng)新時間:2023-11-07

簡要描述:

佛手探針法PCR鑒定試劑盒*公司相關產品 生化管 20支/盒
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實(shi)驗流程(cheng):
1. 整個(ge)檢測(ce)過程(cheng)應嚴格(ge)按照本(ben)說明書要求分別在試劑準(zhun)備區、樣本(ben)處(chu)理區和(he)PCR擴增區(qu)進行操作,各區(qu)實驗(yan)服、儀器 、耗(hao)材應獨立使用(yong)(yong),不能混用(yong)(yong);實驗用(yong)(yong)吸頭(tou)采用(yong)(yong)帶濾(lv)芯吸頭(tou);樣(yang)本處理(li)區(qu)應配(pei)有(you)生物安全柜,樣(yang)本處理(li)在生物安全柜中進行操作;三個區(qu)應該配(pei)有(you)紫外(wai)線殺菌裝置。
2. 為避免(mian)RNA降解,樣本處理過程(cheng)應(ying)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后(hou)立即上機檢測;樣(yang)本處(chu)(chu)理過程中使用的器(qi)具耗材應經(jing)過無(wu)核(he)酶處(chu)(chu)理。
3. 每次實驗應該設置(zhi)陰、陽性對照。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所有試(shi)劑(ji)在使用(yong)前應該(gai)在常溫下充(chong)分(fen)融化混勻,并(bing)應瞬時離心。
5. 試劑盒(he)內所配(pei)陰(yin)性和陽性對照(zhao)在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qu),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾(rao),應避免裸手直接接觸(chu)PCR反應管,并應避(bi)免在PCR反應管上(shang)進(jin)行任何標(biao)記(ji)。
7. 儀器 擴增相關參數應按(an)照本說(shuo)明書(shu)相關要求進行設置;不同批號(hao)試劑不能混用。
8. ABI系列熒(ying)光(guang)定量PCR儀參數(shu)設置中不選(xuan)ROX校正,淬滅基因選(xuan)擇None
9. 實驗過程中產(chan)品的(de)廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

產品名稱

佛手(shou)探針法PCR鑒定(ding)試劑盒*

英文名(ming)稱(cheng)

citri sarcodactylis

貨號(hao)

BH-P99258

特點:
1. 即開(kai)即用,用戶只需要提(ti)供(gong)病毒樣品。
2. 根據地黃保守序列(lie)設計的專一性引(yin)物,與相關病毒無交叉反(fan)應。
3. 靈(ling)敏度可(ke)以達到幾百拷(kao)貝/反應。
4. 一管式(shi)熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染(ran)。
5. 本試(shi)劑盒足夠 50 次(ci) 20μL 反應體(ti)系的熒光定量 PCR
6. 本產(chan)品只適用于(yu)科研,不能用于(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。
使用方(fang)法:
一、樣(yang)品采(cai)集:
1、食品(pin)樣品(pin):樣品(pin)的采集(ji)與預培養(yang)按照樣品(pin)的采集(ji)與預培養(yang)按照《食品(pin)衛生(sheng)微生(sheng)物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要(yao)求進(jin)行(xing)。
2、血液(ye)樣品(pin):用無菌注射(she)器抽取受檢者靜(jing)脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或(huo)檸檬酸鈉)抗凝管,立(li)即(ji)混勻。
3、糞便(bian)樣品(pin):取糞便(bian)置于(yu)滅菌(jun)的收集管中送檢。
4、病(bing)灶(zao)部(bu)位樣品:取發病(bing)部(bu)位新鮮滲出(chu)物、粘液膿(nong)血送(song)檢。
一、稀(xi)釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀(xi)釋(shi)度為例(li))
1. 注意:由于標準品(pin)(pin)濃(nong)度非(fei)常高,因此下列稀釋操(cao)作(zuo)一定(ding)要(yao)在獨立的(de)區域進行,千萬不(bu)能污染樣品(pin)(pin)或(huo)本(ben)(ben)試劑(ji)盒(he)的(de)其他(ta)成分(fen))。為(wei)增加產品(pin)(pin)穩定(ding)性(xing)和避免擴散(san)傳染性(xing)病原,本(ben)(ben)產品(pin)(pin)不(bu)提供(gong)活(huo)體樣品(pin)(pin)做陽性(xing)對照,只提供(gong)可以直接使用的(de) DNA段作為陽性對照(zhao)。
2. 標記 6 個離心管(guan),分別為 765432
3. 用(yong)帶芯槍頭分別加(jia)入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋(shi)液(用帶(dai)芯槍(qiang)頭,下同)。
4. 7 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性對照,充(chong)分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性對照。放(fang)冰上待用。
5. 換槍(qiang)頭,在 6 號管中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(dui)照(上步稀釋所(suo)得),充分震蕩 1 分鐘,得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭(tou),在(zai) 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽性對照到(dao) 5 號(hao)管(guan)中,充分震蕩 1 分鐘,得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的(de)陽性對照。放(fang)冰上(shang)待用。
7. 重(zhong)復(fu)上面的操(cao)作直到得到 6 個稀釋度的陽(yang)性對照(zhao)。放冰上待用。
注:上述樣(yang)品建議(yi)經過增菌后(hou),收集培養物用(yong)于(yu)檢(jian)測。
二、DNA提取(qu):
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以(yi)下(xia)說明進行DNA核(he)酸(suan)的(de)(de)粗提。也(ye)可采購上海澤葉(xie)生物科技有限公司生產的(de)(de)DNA提取(qu)試劑盒(he)(過柱法-熒(ying)光配(pei)套)或其(qi)他合(he)適(shi)的商業化產品,并按照(zhao)相應試劑(ji)盒(he)說(shuo)明進行操作。
1、液體培養物(wu):取液體培養物(wu)100μL加到1.5mL無菌離(li)心管中(zhong),8000rpm離心(xin)3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒(heng)溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
2、固體培養物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品(pin):挑(tiao)取米粒大小(xiao)糞便于滅菌(jun)離心管中(zhong),加入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽水,振蕩混勻(yun),13000rpm離心3分鐘,棄(qi)上(shang)清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充(chong)分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離(li)心3min取上清5μL進行PCR反應。
4、其他液體(ti)標本(ben)(ben):取標本(ben)(ben)2-3mL13000rpm離心3min,棄上清(qing),沉淀(dian)中加入50μL DNA抽(chou)提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(ying)。
注:陽性(xing)對(dui)照和陰性(xing)對(dui)照為已經抽(chou)提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(ying)體(ti)系中即可。由(you)于(yu)陽(yang)性對照濃度較高(gao),建(jian)議在樣品(pin)制備區域加入陽(yang)性對照。
HEH
人胚胎心臟組織來源(yuan)細胞群勃龍醋酸酯 Revalor-H Trenbolone acetate質量規格:>98%,BR,可用(yong)于細胞培養

CM-R083大(da)鼠滑膜細胞*培養基100mL(標準品)Silibinin質量規格(ge):HPLC>97%,標準品

NCI-N87 [N87]人胃癌細(xi)胞Silibinin質量規格:>97%,BR

EB病(bing)毒轉(zhuan)化的(de)人B細(xi)胞;KMY0928 人前脂肪(fang)細胞*培養基(ji) 100mL依澤替米(mi)貝(bei);依(yi)折麥布(bu)Ezetimibe質量規格:>99%

小(xiao)鼠(shu)星形膠質(zhi)細胞MA依澤替米貝;依折麥布(標準品(pin))Ezetimibe質(zhi)量(liang)規格:HPLC>99%,標準(zhun)品
L W-3A 小鼠皮下結締組(zu)織細胞羥基Hydroxy Bosentan質量規格:美(mei)國進口

CM-H067人腎(shen)系膜細胞*培(pei)養基100mLN-去甲基N-Desmethyl Clarithromycin質量規(gui)格:美國(guo)進口

B16-F10, 小鼠色素瘤高(gao)轉(zhuan)移細(xi)胞(bao)阿(a)糖(tang)胞(bao)苷(gan) 5-單(dan)1酸鹽Cytarabine 5'-Mophosphate質(zhi)量規格:美(mei)國進口

人(ren)卵(luan)巢畸胎瘤細胞;PA-1 人視網膜muller細胞*培養基 100mL-d6Dacarbazine-d6質量規格:美國進口

人表皮色素細胞-淺(qian)色素(su)cDNAHEM-l cDNAβ-D-葡(pu)萄(tao)糖苷Dasatinib β-D-Glucuronide質量規格:美國進口(kou)
人表皮色素細胞(bao)-中色素(HEM)( 5×105 ) MN-c, 小鼠皮質神(shen)經元 Mouse質(zhi)量規格:>98.0%,可(ke)用于細(xi)胞培養Riimin

CM-H008人(ren)氣管上(shang)皮細胞*培養基100mL(標準品)質量規格:>98%,標準品(pin)Riimin

ADAM17 Others Rat 大鼠 ADAM17 人細胞裂解液 (陽性對(dui)照) (標準品(pin))質量規格:HPLC>98%,標準(zhun)品Bicalutamide

原代神經膠質細胞特制(zhi)基礎培養基Many types of cells包裝:500/250/100ml質量規格(ge):>98.5%,USP,可用于細胞(bao)培(pei)養(yang)Busulfan/Myleran

6T-CEM細(xi)胞,人T細胞白血(xue)病細胞 綠(lv)色熒光(guang)蛋白標記(ji)小鼠子細(xi)胞,U14-GFP細胞 前脂肪細胞分化培養基PADM-prf(標準品(pin))質量規格:HPLC>98%,標準(zhun)品Busulfan/Myleran
佛手探針(zhen)法(fa)PCR鑒定試劑盒*成纖維細胞-胎(tai)兒總RNAHDF-f NA絞股藍皂苷XLIX(標準品)質量規(gui)格:HPLC98%,標準品(pin)Gypeside XLIX

KIT Others Rat 大(da)鼠 KIT / c-KIT 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對照) YM-201636質量(liang)規格:>98%,PIKfyve抑(yi)制(zhi)劑YM201636

微血(xue)管內皮細胞*培養基 100mL金石蠶苷(標準品)質量規格:HPLC98%,標準品Poliumoside

VERO E6細(xi)胞,猴腎(shen)細(xi)胞系(xi) Lec1(卵巢細胞) 小鼠結締組織(zhi)L細胞株929克隆;L-9
儲存條件:
14℃或(huo)-20℃樣品(pin)收集(ji)、處理及保存方(fang)法
1. 血清(qing):使(shi)用(yong)不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何(he)細胞刺激,收(shou)集(ji)血液后,3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)將血清(qing)和紅細胞迅速小心地(di)分(fen)離(li)。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素(su)抗凝(ning)。3000 轉離心30 分鐘(zhong)取上清。
3. 細胞上清液(ye):3000 轉離心10 分鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)和(he)聚(ju)合物。
4. 組織(zhi)勻漿(jiang):將組織(zhi)加入適(shi)量生理鹽水搗(dao)碎。3000 轉離心10 分鐘取上(shang)清。
5. 保存:如果樣本收集后不(bu)及時檢測,請按一次用量(liang)分裝(zhuang),凍存于-20℃,避免反復凍(dong)融(rong),在室溫下解(jie)凍(dong)并確(que)保樣品(pin)均(jun)勻地充分(fen)解(jie)凍(dong)。

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