儲存(cun)條件：
14℃或－20℃樣品收集(ji)、處理及保存方法
1. 血(xue)清：使用(yong)不含熱原和內毒素的試(shi)管(guan)，操(cao)作過(guo)程中避免任何細胞刺激，收(shou)集血(xue)液后，3000 轉離心10 分(fen)鐘將血清和紅(hong)細胞迅(xun)速小心地分(fen)離。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽或肝素(su)抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚(ju)合物。
4. 組織(zhi)勻漿(jiang)：將(jiang)組織(zhi)加入(ru)適量生理(li)鹽水搗碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)取上清。
5. 保存(cun)：如果(guo)樣本(ben)收集后(hou)不及時檢測，請按一次(ci)用量分裝，凍存(cun)于(yu)-20℃，避免反復凍融，在室(shi)溫下解凍并確保(bao)樣品均勻地充分(fen)解凍。

特點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用，用戶只(zhi)需(xu)要提(ti)供病毒樣品。
2. 根據(ju)地黃保(bao)守序列設計(ji)的專一(yi)性(xing)引物，與相(xiang)關病毒無交叉反(fan)應。
3. 靈敏度可以(yi)達(da)到幾百拷貝/反應(ying)。
4. 一(yi)管(guan)式(shi)熒(ying)光定量 PCR 檢測，避免后(hou)續污染(ran)。
5. 本(ben)試劑盒足夠 50 次(ci) 20μL 反應體系的熒光定量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品只適用(yong)于科研，不能用(yong)于臨床診斷(duan)。

使(shi)用方法：
一、樣(yang)品采集：
1、食(shi)品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采集與(yu)預培養按照樣(yang)品的(de)采集與(yu)預培養按照《食(shi)品衛生微生物學(xue)檢驗阪崎腸桿(gan)菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器(qi)抽(chou)取受(shou)檢者(zhe)靜脈(mo)血2mL，注入無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸檬酸鈉)抗凝(ning)管，立即混(hun)勻(yun)。
3、糞便樣品(pin)：取糞便置于(yu)滅(mie)菌的收集管(guan)中(zhong)送檢。
4、病灶部位樣品(pin)：取發病部位新(xin)鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(dui)照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品(pin)(pin)濃(nong)度(du)非(fei)常高，因此下列(lie)稀(xi)釋操作(zuo)一定要在(zai)獨立的(de)區域進行(xing)，千萬不能污染樣品(pin)(pin)或(huo)本試(shi)劑盒的(de)其他成分(fen)）。為增加產(chan)品(pin)(pin)穩(wen)定性(xing)和避免擴(kuo)散(san)傳染性(xing)病原，本產(chan)品(pin)(pin)不提(ti)供活體(ti)樣品(pin)(pin)做陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)，只提(ti)供可以直(zhi)接使用(yong)的(de) DNA段作(zuo)為(wei)陽性(xing)對照。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離心管，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模(mo)板稀(xi)釋液（用帶芯槍頭(tou)，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性(xing)對照，充分震蕩 1 分(fen)鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
5. 換(huan)槍頭，在 6 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(上(shang)步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對照。放冰(bing)上待用。
6. 換槍(qiang)頭，在(zai) 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(zhao)到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的陽性(xing)對照。放冰上待(dai)用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放(fang)冰上待用。
注：上(shang)述樣品建議經過增菌后(hou)，收集培養物用(yong)于檢測(ce)。 
二(er)、DNA提取：
可采用PCR試劑盒配備(bei)的DNA抽提液，按以下說(shuo)明進(jin)行DNA核酸的(de)粗(cu)提。也可采購(gou)上海澤(ze)葉生(sheng)物科技有(you)限公司生(sheng)產的(de)DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套(tao))或其他合適的商業化產品，并(bing)按照相應試劑(ji)盒說明進行操作。
1、液(ye)體培(pei)養物：取液(ye)體培(pei)養物100μL加(jia)到1.5mL無菌離心管(guan)中，8000rpm離(li)心3min，盡量吸(xi)棄上清，加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進行PCR反應。
2、固體(ti)培(pei)養物：挑取(qu)單(dan)克隆菌落與50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清5μL進(jin)行PCR反應。
3、糞(fen)便樣(yang)品：挑取米粒大(da)小(xiao)糞(fen)便于滅菌離心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混(hun)勻，13000rpm離心3分(fen)鐘，棄上清，沉淀中(zhong)加入50μL DNA抽提液(ye)充(chong)分混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反(fan)應。
4、其他液體標本(ben)：取標本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀(dian)中加入50μL DNA抽提(ti)液充分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取上清(qing)5μL進行PCR反(fan)應。
注：陽性(xing)對照和陰性(xing)對照為(wei)已經抽提好的核(he)酸(suan)(無(wu)需(xu)提取)，直接取5μL加(jia)入(ru)到(dao)反應體系中即可。由于陽性對(dui)照濃度較高，建議在樣品制備區域加(jia)入(ru)陽性對(dui)照。 
HCMEC-c 人類心臟微血管內(nei)皮細胞(HCMEC) 500,000cells 腦靜脈血管(guan)平(ping)滑肌細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)（標準品(pin)）Hydrocortisone質量規格：HPLC>98%,標準品(pin)

神(shen)經膠質細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)富馬酸(suan)伊布利特Ibutilide fumarate 質量(liang)規格：>99%,BR

SORCS1 Others Human 人 SORCS1 人細胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照) 富馬酸伊(yi)布利特(te)(標準(zhun)品(pin))Ibutilide fumarate 質量規格：HPLC≥98%,標(biao)準品

Oregon vole 俄(e)勒岡地鼠硫酸異帕米(mi)星Isepamicine Sulphate質量(liang)規格(ge)：含量(liang)≥670µg/mg

豬腎(shen)細(xi)胞(bao);PK(15)蓓薩(sa)羅丁;貝沙羅汀Bexarotene質量規格：>99%
RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性對照(zhao)) 2-(4-甲氧(yang)苯基)-4,6-雙(shuang)(三氯(lv)甲(jia)基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine質量規(gui)格：>98.0%(GC)

恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]三苯基溴(xiu)化(hua)锍(liu)(>98.0%(T))Triphenylsulfonium Bromide質(zhi)量規格：>98.0%(T)

AFM Others Human 人 AFM / Afamin 人細胞裂解(jie)液 (陽性(xing)對照) 2-溴咪唑并[1,2-a]吡嗪6-Bromoimidazo[1,2-a]pyrazine質量規(gui)格：>98%

小腸平(ping)滑肌細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(1ml)1,2-1,2-Propanediol質量(liang)規格(ge)：AR,分析

NCI-H209細胞，人小細胞肺癌 人癌抗雌(ci)激素耐藥株,LCC9細胞(bao) 上皮(pi)細胞生長添加物(wu)MEpiCGSTBB(4,5,6,7-四溴-1H-苯(ben)并三唑)TBBT;NSC 231634質量規格(ge)：>98%,蛋(dan)白(bai)激酶抑制(zhi)劑
NCI-H716(人結直(zhi)腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 MDA-MB-231(癌細(xi)胞(bao))/氨芐(標準品)質量(liang)規格：含量(liang)測定Ampicillin Trihydrate

CL-0424RK1(大鼠(shu)腎細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2阿替美唑鹽酸鹽質量規(gui)格(ge)：>99%,BRAtipamezole HCl

ICOSLG Others Human 人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 人細胞裂(lie)解液 (陽性對照) 阿(a)替美唑(zuo)鹽酸鹽(標準(zhun)品(pin))質量規格：>98%,標準品Atipamezole HCl

人(ren)內根殼(ke)細(xi)胞RNAHHIRSC miRNA5 μg阿糖胞苷（標準品）質(zhi)量規格：HPLC>99%,標準(zhun)品Cytarabine

QBC939細胞，人膽管癌細胞 褐鼠(shu)胰島素瘤(liu)上皮(pi)細胞,RIN-m細胞 NIH/3T3, 小鼠成(cheng)纖維細胞系質量規格：>98.5%,USP31,BR,可用于細(xi)胞培養(yang)Dacarbazine
雷丸探針法PCR鑒定(ding)試劑盒(he)說明書人羊(yang)膜上(shang)皮細胞RNAHAmEpiC miRNA5 μg雌激素酮硫(liu)酸鹽，去氫表雄酮硫(liu)酸鈉質(zhi)量規(gui)格：>98%Dehydroepiandrosterone-3-sulfate

SELP Others Mouse 小鼠(shu) SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 纈鹽(yan)酸鹽(yan) 質量(liang)規格(ge)：>99%,USPValganciclovir

SV40轉化的非洲綠猴腎(shen)細胞;COS-1肌(ji)醇質量規格：>99%,BRIsitol

CL187/CCL187細(xi)胞，人大腸癌細(xi)胞 人色(se)素
實(shi)驗流程(cheng)：
1. 整個檢(jian)測過程(cheng)應(ying)嚴(yan)格按照本說明(ming)書要求分別(bie)在試(shi)劑(ji)準備區、樣本處理區和PCR擴增(zeng)區進行操作，各(ge)區實驗(yan)服、儀(yi)器 、耗(hao)材應獨立使用(yong)，不能混用(yong)；實驗用(yong)吸頭(tou)采用(yong)帶濾芯吸頭(tou)；樣本處理區應配有生物(wu)安(an)全(quan)柜(ju)，樣本處理在生物(wu)安(an)全(quan)柜(ju)中進行操(cao)作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避(bi)免RNA降解(jie)，樣本(ben)處理過程應在0-4℃條件(jian)下操作，且完(wan)成實驗后立即(ji)上機檢測；樣本處理過程(cheng)中使(shi)用的器(qi)具耗材(cai)應經過無核酶(mei)處理。

3. 每次(ci)實驗應該(gai)設置陰、陽性(xing)對照。
4. 試(shi)劑盒所有試(shi)劑在(zai)使用前應(ying)該在(zai)常(chang)溫下充(chong)分融化(hua)混勻，并應(ying)瞬(shun)時離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑盒內所配陰性(xing)和陽性(xing)對照(zhao)在一次使用前應(ying)全部轉移至標本準備區，并(bing)單獨(du)存放(fang)。
6. 為防止熒光(guang)干擾，應避免裸手直接(jie)接(jie)觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上(shang)進行任何標(biao)記。
7. 儀器 擴增相關(guan)參數(shu)應按照本說明書相關(guan)要求進行(xing)設置(zhi)；不同批號試(shi)劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中(zhong)不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過程中產品的廢(fei)棄(qi)物(wu)應該(gai)進行無(wu)害化處理后方可丟棄(qi)。