公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細胞培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇細(xi)胞：以下細(xi)胞培(pei)(pei)(pei)養凍(dong)存處理僅供參考，具(ju)體(ti)操作(zuo)步驟以隨貨產品說(shuo)明書為主(zhu)。將(jiang)(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的凍(dong)存管在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)(pei)(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)(pei)(pei)養基(ji)后吹勻。然后將(jiang)(jiang)所有細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入含(han)適量培(pei)(pei)(pei)養基(ji)的培(pei)(pei)(pei)養瓶中(zhong)培(pei)(pei)(pei)養過(guo)夜（或(huo)將(jiang)(jiang)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培(pei)(pei)(pei)養基(ji)，培(pei)(pei)(pei)養過(guo)夜）。第(di)二天(tian)換液(ye)并檢查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可進行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去培養上(shang)清，用不含鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶中(zhong)，使消(xiao)(xiao)化液浸潤(run)所(suo)有細胞(bao)，將培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶置于(yu)37℃培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)(xiao)化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況(kuang)而定），然后在顯微鏡(jing)下觀察細胞(bao)消(xiao)(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大部分變圓(yuan)并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶后加2-3ml培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)(xiao)化。輕輕打勻(yun)后裝入無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)(yang)(yang)液后吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液按1:2比例分到新的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)于培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)凍存(cun)：待細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生長(chang)狀態良(liang)好(hao)時，可進行細(xi)(xi)胞(bao)(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例；a、收集細(xi)(xi)胞(bao)(bao)及(ji)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入無菌離心(xin)(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離心(xin)(xin)4 min，棄去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗一(yi)遍，棄盡PBS，進行細(xi)(xi)胞(bao)(bao)計數。

b、根據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液，注意(yi)凍存(cun)管(guan)做好標(biao)識。將凍存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h后轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位(wei)置以便下次拿取。

三(san)、培養注意事(shi)項(xiang)

1. 收到(dao)細(xi)胞后首先觀(guan)察細(xi)胞瓶是(shi)否(fou)完好(hao)，培養液(ye)是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有上述現(xian)象 發(fa)生請及時和我們(men)聯系。

2. 仔細閱(yue)讀細胞(bao)(bao)(bao)(bao)說明(ming)書，了(le)解細胞(bao)(bao)(bao)(bao)相關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞(bao)(bao)(bao)(bao)形態(tai)、所用培(pei)養(yang)基、血清比(bi)例、所需(xu) 細胞(bao)(bao)(bao)(bao)因子等，確保細胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)條件一(yi)致，若由(you)于培(pei)養(yang)條件不一(yi)致而導致細胞(bao)(bao)(bao)(bao)出現問題，責(ze)任由(you) 客戶自行(xing)承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運輸問題，部分細(xi)胞(bao)由于(yu)溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)后，75%酒精消毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置于(yu) 37℃培養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可(ke)以消化，懸浮細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培(pei)養基重懸 細胞(bao)，并接種到新的培(pei)養瓶或培(pei)養皿(min)中(zhong)，置于培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進行培(pei)養。

5. 請客戶(hu)用相同條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用于細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶(hu)收(shou)到細(xi)(xi)(xi)胞后前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細(xi)(xi)(xi)胞照片，記錄細(xi)(xi)(xi)胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運(yun)輸的原因，個別敏感細(xi)(xi)(xi)胞會(hui)出現不穩(wen)定的情(qing)況，請(qing)及時(shi)和我們聯系(xi)，告(gao)知細(xi)(xi)(xi)胞 的具體情(qing)況，以便我們的技術人員跟蹤(zong)回訪直至問題解決。

7. 該細胞(bao)僅供科研使(shi)用。

8. 備(bei)注：運輸用(yong)的(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji) (灌液培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)) 不能再用(yong)來(lai)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)細(xi)胞，請(qing)換用(yong)按照(zhao)說明書細(xi)胞培(pei)(pei)(pei) 養(yang)(yang)條件新配制的(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)來(lai)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)細(xi)胞。     收到細(xi)胞后第一(yi)次傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 注(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司正在出售的(de)產品：

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白 大鼠腫瘤壞死因子配體超家族成員12(TNFSF12)ELISA試劑盒 Rabbit Anti-FITC 兔抗熒光素 0.1ml

Leptin receptor： 瘦素受體抗體 DCLK1 Others Human 人 DCAMKL1 / DCLK1 (aa 1-705) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠肝竇內皮細胞培養基 100mL 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒 Goat IgG 羊IgG 10mg

LRP6： 低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體 U266B1 [U266], 人多發性骨髓瘤細胞 骨肉瘤細胞,Saos-2細胞 CFPAC-1(胰腺癌細胞)

CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA 試劑盒 Goat Anti-human IgA/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗人IgA 0.1ml

PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人可溶性0脂酶A2(sPL-A2)ELISA 試劑盒 c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原) 0.5mg

Heme Oxygenase 1： 血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體 MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細胞裂解液 (陽性對照)

肺成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA 試劑盒 HCLS1 造血干細胞特異性蛋白 0.5mg

Phospho-HER3 (Tyr1289)： 0酸化HER3受體抗體 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1 張氏肝細胞，HeLa[Chang Liver]細胞 LLC-PK1細胞，豬腎細胞

CDH1 Others Rat 大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人細胞裂解液 (陽性對照) 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA 試劑盒 ChRM2 (Music Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰受體(抗原) 0.5mg

A-204人(ren)橫紋肌肉(rou)瘤細胞ES-2 人卵巢透明細胞癌細胞 大鼠結蛋白(Des)ELISA 試劑盒 Apo A1(Human anti-apolipoprotein A1 antibody)  人抗載脂蛋白抗體 T-24細胞，膀胱變移細胞癌 人肺鱗癌細胞,SK-MES-1細胞 UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌

PRLR Others Rat 大鼠 PRLR / Prolactin receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠節律晝夜蛋白2(PER2)ELISA試劑盒 Alpha1-AGP(Mouse Alpha1-Acid glycoprotein) 小鼠α1酸性糖蛋白 96T

PCK1： 0酸烯醇酸羧激酶抗體 CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞)5×106cells/瓶×2

CW-2人結腸腺癌細胞 CW-2 human colon adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠接觸蛋白4(CN4)ELISA試劑盒 25(OH)D3/25 HVD3  大鼠25羥基維生3 96T

PFKFB1： 果糖-2,6-二0酸酶1抗體 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)