特點優勢：

    1.特異性：所有(you)產(chan)品使用的引(yin)物均(jun)經過(guo)詳盡(jin)的生物信息學分(fen)析，經過(guo)GenBank及自建龐大數據庫(ku)的(de)比對，確保所用的(de)每一(yi)條引物(wu)均(jun)為種(zhong)屬或血清(qing)型特(te)(te)異的(de)基(ji)因序列區段，可(ke)實現對細菌種(zhong)屬及血清(qing)型的(de)特(te)(te)異檢測，特(te)(te)異性(xing)均(jun)達到佳 。

    2.   重現(xian)性：該(gai)系列所(suo)有產品均經過大(da)量(liang)實驗(yan)菌株的(de)驗(yan)證，重現(xian)性為佳 。

    3.   靈(ling)敏性：該系列產品(pin)(pin)可實現對(dui)檢測菌的高靈(ling)敏檢測，當樣品(pin)(pin)中(zhong)細菌的濃度(du)達到103cfu/ml時，可實現對其的(de)直接檢測，無需繁瑣的(de)增菌過程(cheng)。

    4.   實用性：檢測范圍(wei)廣，涵蓋(gai)了對(dui)人體危害較為嚴(yan)重的(de)17種呼(hu)吸道(dao)及腸(chang)道(dao)致病(bing)菌，可實(shi)現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為(wei)3-4個小時。

    5.   優勢1：序列資源豐富(fu)，除GenBank公布(bu)的序列外，公司還進行了大量(liang)菌(jun)株的序列破(po)譯，從理論上保(bao)證所選引物具有良(liang)好的保(bao)守性和特異性。

    6.   優勢2：該系(xi)列(lie)試劑盒均經過大(da)量的保守性(xing)(xing)及(ji)特異(yi)性(xing)(xing)實驗驗證，憑(ping)借公(gong)司擁有的豐富的菌(jun)種資源，每一種檢(jian)測試劑盒均經過了20余種標(biao)準菌(jun)株(zhu)和臨床菌(jun)株(zhu)的保(bao)守性(xing)驗證(zheng)及40余種近緣(yuan)標準(zhun)菌(jun)株和臨床(chuang)菌(jun)株的(de)特(te)異性驗證，確保在使用過(guo)程中不會出現任何的(de)假(jia)陽(yang)性及(ji)假(jia)陰性報告結果。

提取步驟(zou)：

1.從負(fu)八十冰(bing)箱取出樣品(pin)，放置(zhi)于冰(bing)上緩慢解凍； （提前預(yu)冷離心機至4度）

2.待解凍后（紅(hong)色），加入200 μl氯仿(fang)（加入氯仿(fang)體積(ji)為(wei)Trizol體積(ji)的1/5），劇烈震蕩（乳白紅(hong)色），冰上靜置10 min。 （氯仿(fang)為(wei)有(you)機溶(rong)劑(ji)，有(you)效(xiao)的使有(you)機相(xiang)和(he)無(wu)機相(xiang)迅速分離。有(you)機相(xiang)中主要(yao)是酚和(he)蛋白結合(he)，從而使得蛋白和(he)RNA脫離，RNA進入水相(xiang)。）

3.放置(zhi)于預冷離(li)心機，離(li)心（4度(du)，12000 rpm，15 min），離(li)心后可見明顯分(fen)三層(ceng)(ceng)(ceng)（上層(ceng)(ceng)(ceng)無色透明水相為(wei)RNA層(ceng)(ceng)(ceng)，中間很薄的乳白(bai)色為(wei)DNA層(ceng)(ceng)(ceng)，下層(ceng)(ceng)(ceng)為(wei)紅色為(wei)蛋白(bai)層(ceng)(ceng)(ceng)）。

4.小心緩慢吸(xi)取(qu)(qu)上清，約400 μl（寧(ning)可少(shao)吸(xi)，也不要多吸(xi)取(qu)(qu)），置于另一個新的(de)1.5 ml RNase-free EP管中，加入等(deng)體(ti)積的(de)異(yi)丙醇，上下顛倒混勻，常溫靜置放(fang)置15 min。

5.離心（4度，12000 rpm，15 min），可見白色沉(chen)淀(dian)(dian)（有時細胞(bao)較少(shao)看不(bu)到沉(chen)淀(dian)(dian)，可放置負二(er)十(shi)或負八十(shi)兩(liang)小時再繼續后面步驟）

6.棄上(shang)清，每(mei)管加入950 ul 75% 乙醇，上(shang)下顛倒混(hun)(hun)勻（切(qie)記不要用(yong)槍吹打混(hun)(hun)勻，這樣會造成RNA溶解(jie)）。

7.離心（4度，12000 rpm，10 min），可見底部明顯白色沉淀。

8.離(li)心后，棄(qi)掉上(shang)清，放入離(li)心機再次(ci)瞬(shun)離(li)，用10 μl 的移液器洗去殘留(liu)液體， 開蓋晾干（約5 min）。

9.每個樣品根據沉淀大小加入適量(liang)DEPC水(shui)(shui)（一(yi)般20~30 μl，有時(shi)看不到沉淀，可加10 μl DEPC水(shui)(shui)溶解），吹打溶解RNA，十一(yi)樓酶標(biao)儀(yi)測(ce)濃(nong)度，OD值(zhi)（260/280=1.8-2.0）標(biao)記，負八十保存。

備(bei)注(zhu)：對于中性粒細胞(bao)提取(qu)RNA建議細胞數目大于(yu)2x106/樣品；

備注：操作(zuo)過程中佩戴口罩(zhao)。

PCR反應五要素：
參加(jia)PCR反應的物質主要有(you)五種即引物、酶、dNTP、模板(ban)和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性(xing)反應的(de)關鍵，PCR 產物的(de)特異性(xing)取(qu)決(jue)于引物與模板(ban)DNA互(hu)補(bu)的(de)程度。理論上，只要知道任(ren)何一段模板(ban)DNA序(xu)列，就能按其設(she)計互(hu)補(bu)的(de)寡(gua)核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板(ban)DNA在體外大量擴增。
設(she)計引物應(ying)遵循以下原則：
①引(yin)物長度(du)： 15-30bp，常用(yong)為20bp左右。
②引物擴增(zeng)跨度： 以(yi)200-500bp為(wei)宜(yi)，特定條件(jian)下可擴增(zeng)長至10kb的片段(duan)。
③引物堿基(ji)：G+C含(han)量(liang)以40-60%為宜，G+C太(tai)少擴增效果不佳，G+C過多易(yi)出現非(fei)特(te)異條(tiao)帶。ATGC好隨機分布(bu)，避免5個以上(shang)的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避(bi)免引物內(nei)部出現二級結構，避(bi)免兩條(tiao)引物間互補，特別是3’端的互補，否則會形成(cheng)引物二聚體(ti)，產生非(fei)特異的擴增條(tiao)帶。
⑤引物3’端的堿(jian)基，特(te)別是 末及倒(dao)數(shu) 個堿(jian)基，應嚴格要求配(pei)對，以避免因末端堿(jian)基不配(pei)對而導致PCR失(shi)敗。
⑥引物(wu)中有(you)或(huo)能加上合(he)適的酶(mei)切(qie)位點，被(bei)擴增的靶序列(lie) 有(you)適宜的酶(mei)切(qie)位點，這對酶(mei)切(qie)分析或(huo)分子克隆很(hen)有(you)好處。
⑦引(yin)物(wu)的(de)特異(yi)性：引(yin)物(wu)應(ying)與核酸序列數據庫的(de)其它序列無明顯同源性。

注意事項: 

1． 試(shi)劑盒從冷藏環境中取出(chu)(chu)應在室溫(wen)平衡15-30分鐘后方可(ke)(ke)(ke)使(shi)用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入(ru)密(mi)封袋中保存。濃(nong)洗滌液可(ke)(ke)(ke)能會(hui)有結晶析出(chu)(chu)，稀釋時可(ke)(ke)(ke)在水(shui)浴中加(jia)溫(wen)助溶，洗滌時不影響結果。

2.各步加(jia)樣(yang)均應使用(yong)加(jia)樣(yang)器(qi)，并經(jing)常校對其準確性(xing)，以避免試驗(yan)誤差(cha)。一次加(jia)樣(yang)時間(jian)控制(zhi)在5分鐘內，如標本數量多，推薦(jian)使用(yong)排(pai)槍加(jia)樣(yang)。

3.請每次測定的同時做標準曲線(xian)，做(zuo)復孔。如標本中待測物質含量過(guo)高（樣本OD值大于標準品孔(kong)di一(yi)孔(kong)的OD值），請(qing)先用樣品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)一(yi)定倍數(shu)（n倍）后(hou)再測(ce)定，計算時請(qing)再(zai)乘以總(zong)稀釋(shi)倍數（×n×5）。

4.封板膜只(zhi)限一(yi)次性使用，以避免交叉污染(ran)。

5.底(di)物請避光保存。

6.嚴格按照說(shuo)明書的操作進行，試驗結(jie)果(guo)判定必須以酶標儀(yi)讀數為準.

7.所有樣(yang)品(pin)，洗滌(di)液和各種(zhong)廢(fei)棄物都應按傳染(ran)物處理。

8.本(ben)試劑(ji)不同批號組分不得混用。

9.不能使用(yong)過期產品。

10. 如與英(ying)(ying)文(wen)(wen)說(shuo)明書有(you)異，以英(ying)(ying)文(wen)(wen)說(shuo)明書為準。