公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二(er)、細胞培(pei)養操作

1) 復蘇細(xi)(xi)(xi)(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)凍存(cun)處理(li)僅供(gong)參考，具(ju)體操(cao)作步驟以(yi)隨貨產品(pin)說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含有1 mL細(xi)(xi)(xi)(xi)胞懸液(ye)的凍存(cun)管在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃解凍，加(jia)(jia)4 mL培(pei)(pei)養(yang)基混合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄去上清液(ye)，加(jia)(jia)1-2 mL培(pei)(pei)養(yang)基后吹勻(yun)。然后將所有細(xi)(xi)(xi)(xi)胞懸液(ye)加(jia)(jia)入(ru)含適量培(pei)(pei)養(yang)基的培(pei)(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)(pei)養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)(xi)(xi)(xi)胞懸液(ye)加(jia)(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)(jia)入(ru)約8 mL培(pei)(pei)養(yang)基，培(pei)(pei)養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)并檢查細(xi)(xi)(xi)(xi)胞密度(du)。

2) 細胞(bao)(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細胞(bao)(bao)密度達 80%-90%，即可(ke)進行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去培(pei)養上清(qing)，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶(ping)(ping)中，使消(xiao)化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細(xi)(xi)胞(bao)，將培養瓶(ping)(ping)置于37℃培養箱中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)(xi)胞(bao)情況(kuang)而(er)定），然(ran)后在顯微鏡(jing)下觀察細(xi)(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若細(xi)(xi)胞(bao)大部分變圓并脫落，迅速拿回(hui)操作臺，輕敲幾下培養瓶(ping)(ping)后加2-3ml培養基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕打(da)勻后裝入無菌離心(xin)(xin)管中，1000 rpm離心(xin)(xin)5 min，棄去上清液，補(bu)加1-2 mL培養液后吹勻。

c、將細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)懸液按1:2比例(li)分(fen)到新的含8 mL培(pei)養(yang)基的新皿中(zhong)(zhong)或者瓶中(zhong)(zhong)，置于(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)凍(dong)存：待細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生長狀態良好時，可進(jin)行細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)及細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)液，裝入無菌離(li)心管中(zhong)(zhong)，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄(qi)去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗一遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)計(ji)數。

b、根據細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)數量加入無血(xue)清(qing)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)凍(dong)存(cun)(cun)液，使細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支凍(dong)存(cun)(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)(cun)1mL細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液，注(zhu)意凍(dong)存(cun)(cun)管(guan)做好標識。將凍(dong)存(cun)(cun)管(guan)放入-80℃冰(bing)箱，24 h后轉入液氮灌儲存(cun)(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)(cun)管(guan)位置以便下(xia)次拿取(qu)。

三、培(pei)養注意事項

1. 收到(dao)細胞后首(shou)先觀(guan)察細胞瓶(ping)是(shi)否完好，培養液是(shi)否有(you)漏液、渾濁等(deng)現象，若有(you)上述現象 發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞(bao)(bao)說明書(shu)，了(le)解細胞(bao)(bao)相關信息(xi)，如細胞(bao)(bao)形(xing)態、所(suo)用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細胞(bao)(bao)因子等，確保細胞(bao)(bao)培養(yang)條件(jian)一(yi)致(zhi)，若由(you)于培養(yang)條件(jian)不一(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞(bao)(bao)出現問題，責任由(you) 客戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xi)胞(bao)(bao)瓶(ping)(ping)表面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)(bao)狀(zhuang)態。因運輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)(bao)由于(yu)溫度(du) 變化及劇烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成碎(sui)片，是正常現象。觀察好(hao)細(xi)胞(bao)(bao)狀(zhuang)態后，75%酒精消毒瓶(ping)(ping)壁將 T25 瓶(ping)(ping)置于(yu) 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)(xi)胞可以消化，懸(xuan)浮細(xi)(xi)胞直接(jie)混勻收集細(xi)(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮的培(pei)(pei)養基重懸(xuan) 細(xi)(xi)胞，并接(jie)種到新的培(pei)(pei)養瓶或培(pei)(pei)養皿中，置于培(pei)(pei)養箱中進行培(pei)(pei)養。

5. 請客戶用相同條件的培(pei)養基用于(yu)細胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞(bao)(bao)后前 3 天各拍幾張(zhang)細胞(bao)(bao)照片，記錄(lu)細胞(bao)(bao)狀態，便于和(he)(he)我司技(ji)術(shu)部(bu)溝通 交流。由于運輸的原因(yin)，個別敏感細胞(bao)(bao)會出現不穩定的情(qing)況，請及時和(he)(he)我們(men)聯系，告知(zhi)細胞(bao)(bao) 的具體情(qing)況，以便我們(men)的技(ji)術(shu)人員跟蹤回訪直至問題(ti)解決。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供科研(yan)使用(yong)。

8. 備注：運輸用的培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基 (灌液培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基) 不(bu)能再用來培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)細(xi)(xi)胞，請換用按照說明書細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)(pei) 養(yang)(yang)條件新配(pei)制的培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基來培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)細(xi)(xi)胞。     收到細(xi)(xi)胞后(hou)第(di)一次傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。

公司(si)正在(zai)出售的產品：

A3人T淋巴細胞白血病細胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 rHIL-1Ra/Cy3 熒光素Cy3標記1受體拮抗劑 0.1ml

LLGL2： 相似抑制基因HUGL抗體 CD2 Others Human 人 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人肺成纖維細胞HPF 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(AIL-R3)ELISA試劑盒 KLH/Cy3 熒光素Cy3標記血藍蛋白 0.1ml

LAMTOR1： LAMTOR1蛋白抗體 小鼠胚胎成骨細胞前體細胞;MC3T3-E1

B16-F1(小鼠黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人星形膠質細胞HA 大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體1(AIL-R1)ELISA試劑盒 OVA (Ovalbumin)/Cy3 熒光素Cy3標記雞卵白蛋白 0.1ml

Hurt-78細胞，人T細胞淋巴瘤 小鼠胚胎成纖維細胞,3T3-swiss albino細胞 人肺泡上皮細胞cDNAHPAEpiC cDNA 人可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)ELISA 試劑盒 DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal 雙鏈RNA腺苷酸脫基酶抗原(N端) 0.5mg

GNPTAB： 溶酶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體 PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)

正常大鼠腎細胞;NRK 人可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)ELISA 試劑盒 DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙鏈RNA腺苷酸脫基酶抗原 0.5mg

GSK3 Alpha + Beta： 糖原合酶激酶3α+β抗體 人胚腎細胞;2V6.11

COS-1(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0174NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-2H3 人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA 試劑盒 MMP9 基質金屬蛋白酶9 0.5mg

769-P人腎細胞(bao)(bao)腺癌(ai)細胞(bao)(bao)PKA C alpha+beta： 蛋白激酶C抗體 JAR細胞，胚絨毛癌細胞 人肺腺癌細胞,LTPEP-a-2細胞 KM3, 人多發性骨髓瘤細胞

LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 SLE(Human systemic lupus erythematosus)  人系統性紅斑狼瘡 96T

PHF-tau： 成對螺旋細絲蛋白抗體 CL-0395NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

SW620人結腸癌細胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 Glp-1  大鼠胰高血糖素樣肽1 96T

PITX3： 炎癥因子3抗體 TNFSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BBL / TNFSF9 人細胞裂解液 (陽性對照)